畢赤酵母（Pichia pastoris）作為第二代酵母表達(dá)系統(tǒng)的代表性菌株，已被美國(guó) FDA 認(rèn)定為 GRAS（一般認(rèn)為安全）級(jí)微生物，具備表達(dá)水平高、產(chǎn)物活性優(yōu)、培養(yǎng)成本低、易于擴(kuò)大至工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)勢(shì)。在生物制藥領(lǐng)域，酶制劑、胰島素、表皮生長(zhǎng)因子、膠原蛋白等多款生物制劑，已借助畢赤酵母系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)商業(yè)化生產(chǎn)。和其他產(chǎn)品雜質(zhì)類似，畢赤酵母宿主殘留蛋白（HCP）可能對(duì)生物制品的安全性與有效性造成不利影響，故而在生產(chǎn)監(jiān)測(cè)、產(chǎn)品放行等環(huán)節(jié)中，需對(duì)其開展定量研究并實(shí)施嚴(yán)格控制。SHENTEK^® 畢赤酵母 HCP 殘留檢測(cè)試劑盒（一步酶聯(lián)免疫吸附法），是湖州申科生物自主研發(fā)的畢赤酵母 HCP 通用檢測(cè)試劑盒，不僅擁有完全自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)，還實(shí)現(xiàn)了關(guān)鍵試劑的全國(guó)產(chǎn)化。該試劑盒適用于對(duì) GS115、X33 等畢赤酵母菌株生產(chǎn)的生物制品中宿主殘留蛋白進(jìn)行定量檢測(cè)，具有操作步驟少、檢測(cè)速度快、專一性強(qiáng)、性能穩(wěn)定可靠的特點(diǎn)。

大腸桿菌具有遺傳背景明確、便于培養(yǎng)與調(diào)控、蛋白表達(dá)量高、成本低廉且培養(yǎng)周期短等特點(diǎn)，是性價(jià)比高的蛋白表達(dá)系統(tǒng)。其中，K-12系列與B系列菌株是工業(yè)級(jí)生物工程中常用的大腸桿菌菌株。K-12菌株及其衍生的DH5α、Top10、JM109等菌株，可用于大規(guī)模生產(chǎn)質(zhì)粒DNA，進(jìn)而制備細(xì)胞基因治療產(chǎn)品與病毒載體類疫苗；而源自B系列的菌株（如BL21），更適合高效轉(zhuǎn)染表達(dá)載體及常規(guī)蛋白的表達(dá)，例如病毒蛋白、重組蛋白疫苗、細(xì)胞因子、酶類等產(chǎn)品。湖州申科生物依據(jù)這兩種菌株的特性，分別研發(fā)了大腸桿菌表達(dá)菌HCP殘留檢測(cè)試劑盒與大腸桿菌克隆菌堿裂HCP殘留檢測(cè)試劑盒。

在關(guān)鍵物料開發(fā)基礎(chǔ)上，湖州申科生物 HCP ELISA 檢測(cè)試劑盒的開發(fā)流程還包含第三大關(guān)鍵階段 —— 檢測(cè)體系開發(fā)及驗(yàn)證，這一環(huán)節(jié)直接關(guān)系檢測(cè)方法的可靠性。公司會(huì)開展嚴(yán)格的檢測(cè)體系開發(fā)與驗(yàn)證工作，驗(yàn)證方案完全契合 ICH 指導(dǎo)原則及藥典中關(guān)于分析方法驗(yàn)證的標(biāo)準(zhǔn)要求，確保檢測(cè)體系的科學(xué)性與合規(guī)性。同時(shí)，為進(jìn)一步保障產(chǎn)品品質(zhì)，公司在生產(chǎn)全流程中嚴(yán)格落實(shí)物料質(zhì)量控制，并全程在潔凈車間環(huán)境中完成生產(chǎn)，從過(guò)程管控層面確保試劑盒方法的穩(wěn)健性、重現(xiàn)性與法規(guī)符合性。這套從抗原源頭把控，到關(guān)鍵抗體制備，再到檢測(cè)體系驗(yàn)證與潔凈生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)化、合規(guī)化全流程開發(fā)模式，并非單一環(huán)節(jié)的質(zhì)量管控，而是形成了完整的品質(zhì)保障鏈條，成為湖州申科 宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測(cè)產(chǎn)品品質(zhì)與可靠性的重點(diǎn)支撐。

各國(guó)法規(guī)要求對(duì)生物藥品開展分析與純化處理，以將宿主細(xì)胞蛋白（HCP）降至可接受水平；即便終產(chǎn)品中痕量 HCP 進(jìn)入患者體內(nèi)，目前仍不明確特定殘留蛋白質(zhì)雜質(zhì)是否會(huì)對(duì)藥物的穩(wěn)定性或免疫原性產(chǎn)生影響。在 HCP 限量標(biāo)準(zhǔn)方面，美國(guó)藥典推薦終產(chǎn)品 HCP 水平為 1-100 ng/mg；中國(guó)藥典各論則明確，大腸桿菌（E.coli）菌體 HCP 需不高于蛋白質(zhì)總量的 0.10%（即 1000 ng/mg），CHO 細(xì)胞 HCP 需不高于蛋白質(zhì)總量的 0.05%（即 500 ng/mg），假單胞菌 HCP 需不高于蛋白質(zhì)總量的 0.02%（即 200 ng/mg）。

方法選擇是影響宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留檢測(cè)結(jié)果的因素之一。酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）與液相色譜 - 質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（LC-MS），是當(dāng)前 HCP 檢測(cè)領(lǐng)域的兩類常用方法。據(jù)文獻(xiàn)統(tǒng)計(jì)，當(dāng)前在總 HCP 定量檢測(cè)中，ELISA 仍為主流技術(shù)；而 MS 法可用于特定蛋白（如高風(fēng)險(xiǎn)蛋白）的鑒定與定量，已成為重要的互補(bǔ)手段。此外，檢測(cè)過(guò)程中所用試劑與耗材的質(zhì)量，會(huì)直接影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。質(zhì)量不達(dá)標(biāo)的試劑，可能引發(fā)檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性。舉例來(lái)說(shuō)，若抗體的特異性與親和力不足，可能在 ELISA 檢測(cè)中產(chǎn)生交叉反應(yīng)；若抗原代表性不足或抗體覆蓋率偏低，則可能造成漏檢；而稀釋液抗干擾能力較弱時(shí)，也會(huì)對(duì)檢測(cè)準(zhǔn)確性產(chǎn)生影響。相關(guān)案例研究顯示，采用定制化方法替代原有商業(yè)化試劑盒后，抗原代表性與抗體覆蓋率明顯提升，HCP 檢測(cè)值也呈現(xiàn)整體升高的趨勢(shì)。

全球范圍內(nèi)快速增長(zhǎng)的抗體、蛋白類等生物藥，均由對(duì)應(yīng)的工程細(xì)胞生產(chǎn)制備。在生物制品生產(chǎn)流程中，宿主細(xì)胞產(chǎn)生的內(nèi)源性蛋白（即宿主細(xì)胞蛋白，Host Cell Proteins, HCPs），會(huì)隨不同工藝環(huán)節(jié)部分殘留在終產(chǎn)品中。HCPs 作為外源蛋白，可能在不同程度上誘發(fā)機(jī)體免疫應(yīng)答，進(jìn)而引發(fā)過(guò)敏反應(yīng)或其他不良反應(yīng)；此外，部分殘留 HCPs 具備蛋白酶或脂酶活性，可能造成蛋白藥物或輔料降解，從而加大藥物質(zhì)量與療效的不穩(wěn)定性?；谏鲜鲲L(fēng)險(xiǎn)，對(duì)藥物中 HCPs 開展定性與定量檢測(cè)至關(guān)重要。全球主要藥典（如美國(guó)藥典、歐洲藥典、中國(guó)藥典）均針對(duì) HCPs 檢測(cè)制定了具體要求與標(biāo)準(zhǔn)。