內(nèi)毒素檢測(cè)法規(guī)體系正逐步向非動(dòng)物源試劑傾斜，為重組試劑的應(yīng)用鋪平道路。美國(guó)藥典（USP）已將重組 C 因子（rFC）和重組級(jí)聯(lián)試劑（rCR）正式收錄，于2025 年 5 月納入 USP-NF，明確要求用戶驗(yàn)證重組試劑對(duì)特定產(chǎn)品的適用性。歐洲藥典（EP）通則 2.6.32 已收錄重組 C 因子法，規(guī)定注射用水和純化水可直接采用該方法檢測(cè)，復(fù)雜基質(zhì)樣品需通過(guò)驗(yàn)證后使用。日本藥原則通過(guò)指導(dǎo)原則<G4-4-180>將重組蛋白試劑列為內(nèi)毒素檢測(cè)的補(bǔ)充方法。中國(guó)藥典雖暫未正式收錄重組方法，但 9251《細(xì)菌內(nèi)毒素法應(yīng)用指導(dǎo)原則》為其應(yīng)用提供了框架。這些法規(guī)進(jìn)展共同構(gòu)建了重組試劑的合規(guī)應(yīng)用基礎(chǔ)。

在進(jìn)行內(nèi)毒素檢測(cè)時(shí)，干擾試驗(yàn)又叫增強(qiáng)或抑制試驗(yàn)，主要目的是確證檢測(cè)內(nèi)毒素的方法是否受樣品干擾。在建立細(xì)菌內(nèi)毒素檢查方法中，驗(yàn)證試驗(yàn)前，要去除樣品可能含有的內(nèi)毒素，以確保建立方法的準(zhǔn)確可靠。藥典規(guī)定：①當(dāng)進(jìn)行新藥的內(nèi)毒素檢查試驗(yàn)前，或無(wú)內(nèi)毒素檢查項(xiàng)品種建立內(nèi)毒素檢查法時(shí)，需進(jìn)行干擾試驗(yàn)；②當(dāng)鱟試劑、供試品的配方、生產(chǎn)工藝改變，或試驗(yàn)環(huán)境下發(fā)生了任何有可能影響試驗(yàn)結(jié)果的變化時(shí)，需重新進(jìn)行干擾試驗(yàn)。生產(chǎn)廠家常發(fā)生的一些微小變更，會(huì)影響到評(píng)估結(jié)果，進(jìn)而影響到供試品對(duì)鱟試劑的干擾試驗(yàn)。因此，生產(chǎn)廠家應(yīng)制定一個(gè)重復(fù)進(jìn)行干擾試驗(yàn)的周期，并進(jìn)行跟蹤和記錄。

低內(nèi)毒素回收（LER）又稱(chēng)內(nèi)毒素掩蔽，是指無(wú)菌制劑（尤其蛋白類(lèi)生物制劑）進(jìn)行內(nèi)毒素檢測(cè)時(shí)，加標(biāo)內(nèi)毒素的回收率＜50% 的現(xiàn)象，且無(wú)法通過(guò)稀釋排除，區(qū)別于傳統(tǒng)檢測(cè)干擾。LER 會(huì)導(dǎo)致內(nèi)毒素污染被低估，已被全球監(jiān)管機(jī)構(gòu)重點(diǎn)關(guān)注：FDA 2013 年要求生物藥 BLA 申報(bào)時(shí)提交 LER 研究報(bào)告；EMA 2023 年明確含表面活性劑（如吐溫）或螯合劑（如 EDTA）的制劑需提供 LER 數(shù)據(jù)；中國(guó)藥典 2025 版 9251 通則也新增 LER 內(nèi)容，與國(guó)際接軌。這些要求促使企業(yè)優(yōu)化內(nèi)毒素檢測(cè)流程，避免因 LER 導(dǎo)致的檢測(cè)偏差，確保藥品安全。

生物制品（如單抗、疫苗、重組蛋白）注射劑因直接進(jìn)入人體，對(duì)細(xì)菌內(nèi)毒素殘留限值要求嚴(yán)苛（通?！?.5 EU/mg 或更低），檢測(cè)面臨基質(zhì)復(fù)雜、干擾物質(zhì)多等挑戰(zhàn)。樣品中常見(jiàn)的蛋白質(zhì)、螯合劑、表面活性劑等可能抑制或增強(qiáng) LAL 反應(yīng)，需通過(guò)預(yù)處理消除干擾：如采用稀釋法降低基質(zhì)濃度、添加中和劑（如 Mg2?）修復(fù)反應(yīng)體系，或使用熱滅活去除蛋白類(lèi)干擾物。此外，生物制品生產(chǎn)全流程需進(jìn)行內(nèi)毒素監(jiān)控，從細(xì)胞培養(yǎng)上清、純化中間品到終產(chǎn)品均需檢測(cè)，確保工藝去除內(nèi)毒素的有效性，符合 ICH Q6B 等法規(guī)對(duì) “關(guān)鍵質(zhì)量屬性” 的控制要求。

SHENTEK®重組級(jí)聯(lián)試劑為內(nèi)毒素檢測(cè)高效解決方案。法規(guī)層面，符合美國(guó)藥典（USP）、歐洲藥典（EP）及日本藥典（JP）要求，滿足國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)需求。抗干擾性強(qiáng)，與天然鱟具有相同反應(yīng)機(jī)制，檢測(cè)結(jié)果等效，適配復(fù)雜樣本場(chǎng)景。特異性表現(xiàn)突出，不含 G 因子，避免與 β - D 葡聚糖反應(yīng)產(chǎn)生假陽(yáng)性，保障結(jié)果可靠。檢測(cè)靈敏度高，線性范圍達(dá) 0.005 - 5EU/mL ，可準(zhǔn)確捕捉低濃度內(nèi)毒素。反應(yīng)快速，60分鐘內(nèi)即可完成檢測(cè)，提升檢測(cè)效率。兼容性佳，能兼容動(dòng)態(tài)顯色法的酶標(biāo)儀，無(wú)需額外投入設(shè)備成本。關(guān)鍵的是，無(wú)動(dòng)物源試劑，遵循 3R 原則（減少、替代、優(yōu)化），不依賴(lài)鱟血，解決資源依賴(lài)問(wèn)題，實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期穩(wěn)定供應(yīng)。且通過(guò)重組表達(dá)生產(chǎn)，批次差異小，重復(fù)性好，穩(wěn)定性高，為生物制品、制藥等行業(yè)內(nèi)毒素檢測(cè)提供可靠、可持續(xù)的工具，助力企業(yè)把控質(zhì)量，契合綠色環(huán)保與高效檢測(cè)的雙重需求，在保障檢測(cè)準(zhǔn)確性與合規(guī)性的同時(shí)，推動(dòng)行業(yè)向更環(huán)保、更高效方向發(fā)展。

重組試劑（rCR、rFC）是解決 LER 的重要工具，優(yōu)化內(nèi)毒素檢測(cè)性能。重組鱟試劑（rCR）通過(guò)基因工程表達(dá) C、B 因子及凝固酶原，剔除 G 因子，完全模擬天然鱟級(jí)聯(lián)反應(yīng)，靈敏度達(dá) 0.005EU/mL，與天然方法橋接容易，能避免 LPS 結(jié)構(gòu)變化導(dǎo)致的假陰性；重組 C 因子（rFC）靈敏度 0.005-5EU/mL，性狀穩(wěn)定、均一性好，雖需熒光酶標(biāo)儀，但對(duì)部分 LER 場(chǎng)景（如無(wú)蛋白質(zhì)干擾）適配性強(qiáng)。二者擺脫了天然鱟試劑的局限，為內(nèi)毒素檢測(cè)提供更抗 LER 的選擇，契合行業(yè)技術(shù)趨勢(shì)。