技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供利用gm20541基因構(gòu)建視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的方法和應(yīng)用，采用該構(gòu)建方法可以得到視網(wǎng)膜色素變性疾病模型，該模型可表現(xiàn)出視網(wǎng)膜色素變性性疾病特征，該模型可用于視網(wǎng)膜色素變性性疾病的研究，可以幫助闡明rp的發(fā)病過程及機(jī)制，并為該疾病的或預(yù)防提供新的靶標(biāo)。本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的：方面，本發(fā)明實施例提供了一種利用gm20541基因構(gòu)建視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的方法，其包括：敲除目標(biāo)動物視網(wǎng)膜前體細(xì)胞中的基因組中的gm20541基因。人類疾病的動物模型是指各種醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動物。湖南豚鼠動物模型構(gòu)建

本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)工程技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，涉及一種利用gm20541基因構(gòu)建視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的方法和應(yīng)用。背景技術(shù)：視網(wǎng)膜色素變性(retinitispigmentosa，rp)是一組視網(wǎng)膜光感受器異常導(dǎo)致的遺傳性致盲眼底病，在全世界的發(fā)病率約為1/3000～1/4000，而在中國人群的發(fā)病率可達(dá)1/3500，由于我國人口眾多，rp患者可達(dá)三十萬之眾，給家庭和社會帶來了沉重的負(fù)擔(dān)。目前針對rp的診斷和面臨許多困難，尚無有效的手段，這主要歸因于其在臨床表型和遺傳上具有高度的異質(zhì)性，針對其病理機(jī)制系統(tǒng)研究不足。典型的rp患者早由于視桿細(xì)胞功能缺陷而出現(xiàn)夜盲和視野狹窄，逐步發(fā)展為管狀視野，直至失明；眼底檢查可見視網(wǎng)膜色素沉著。在病理學(xué)方面，典型的rp主要影響視桿細(xì)胞，造成視桿細(xì)胞死亡并繼發(fā)視錐細(xì)胞死亡，主要表現(xiàn)為光感受器受損、變性，視網(wǎng)膜外核層逐漸變薄直至消失，視網(wǎng)膜外網(wǎng)層及其他相關(guān)細(xì)胞層出現(xiàn)相應(yīng)病理改變。此外，由于rp在臨床表型和遺傳模式上均具有高度的異質(zhì)性，導(dǎo)致許多的rp致病機(jī)制尚不清楚，這為rp疾病的臨床診斷帶來極大困難，因此針對rp疾病的致病機(jī)制研究迫在眉睫。而目前，缺乏相應(yīng)的rp疾病模型。湖南乳鼠動物模型實驗室（arteriosclerosis，AS）是一種緩慢進(jìn)行性疾病，嚴(yán)重影響人類健康。

znf124是一種編碼鋅指蛋白的新基因。鋅指蛋白是一類具有手指狀結(jié)構(gòu)域的轉(zhuǎn)錄因子，對基因調(diào)控起重要的作用。znf124蛋白可穿過核孔進(jìn)入核內(nèi)，作為轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控其他基因的表達(dá)。目前針對znf124蛋白功能的研究報道并不多，對其功能也知之甚少，znf124與一種先天性系統(tǒng)發(fā)育疾病dandy-walker復(fù)合征(dandy-walkercomplex，dwc)相關(guān)。此外，znf124被認(rèn)為參與了前體生長因子(vegf)對人造血細(xì)胞凋亡的抑制作用，表明znf124在人體生命活動中承擔(dān)有重要功能。發(fā)明人的另一研究表明，znf124基因突變與rp有關(guān)，對探索rp的致病機(jī)制有極大幫助。因此，深入研究znf124對視網(wǎng)膜色素變性疾病的及病因探討潛力巨大。

把膜先用TBST泡洗兩遍再用5%脫脂奶粉或者BSA室溫封閉1-2小時。注意一定要讓蛋白面充分接觸封閉液。2、孵一抗脫脂奶粉封閉的話，要用TBST泡洗三遍再轉(zhuǎn)移至一抗溶液中，BSA封閉的可以直接轉(zhuǎn)移至一抗中。如果膜的寬(膜是一個長方形，這里的寬與長相對應(yīng))不大于8毫米，我習(xí)慣置于15毫升離心管中孵育，兩條膜"背對背"式放置于一個管子里(3毫升液體即可)。如果大于8毫米，就用普通的5格的一抗孵育盒(4毫升即可)。4度過夜，一般是12-18個小時，注意放置水平，用搖床。內(nèi)參等蛋白豐度很高的如果孵久了可能出現(xiàn)條帶連在一起的情況，這時可以縮短孵育時間或者降低一抗的濃度。六、孵二抗顯影1、孵二抗室溫一個小時足矣。這步要注意的是建議用5%BSA或者脫脂奶粉稀釋二抗，這樣背景會干凈許多。也要注意膜的蛋白面要充分接觸二抗溶液，我們一般一條膜一個槽地孵。2、顯影這一步有個細(xì)節(jié)可能有些同學(xué)沒注意到，就是ECL發(fā)光液要與HRP反應(yīng)一分鐘后顯影效果才會更好，還有要注意的是顯影液要均勻覆蓋，一般第二次顯影(加新的顯影液)比一次好看。大鼠面癱模型的建立。

IgA腎病小鼠模型【目的】建立IgA腎病小鼠模型，并觀察模型的生化及病理指標(biāo)特點。【材料】1、酸化水：鹽酸調(diào)滅菌水；2、蓖麻油+CCl4：5:1配制；3、LPS：；4、血清白蛋白BSA：800mg/kg用量，滅菌水配制；【方法】小鼠BSA+CCl4+脂多糖LPS誘導(dǎo)法1、20g小鼠牛血清白蛋白BSA(800mg/kg)隔天灌胃1次，配制160mg/ml，灌胃100ul/只，持續(xù)8周；2、同時皮下注射蓖麻油和CCl4（5:1），1次/周，持續(xù)8周；3、分別于第6、8周以（）尾靜脈注射LPS，1次/周；4、每兩周取24h尿液一次觀察尿蛋白及紅細(xì)胞；5、每日觀察精神、飲食、大小便，第9周處死，取血和腎、肝做相應(yīng)檢查；6、取尿液后2000r/min離心10min，取上清用全自動生化儀檢測尿蛋白肌酐比值，鏡下觀察尿沉渣中有無紅細(xì)胞。裸鼠皮下成瘤：前肢近腋后皮下注射細(xì)胞懸液； 裸鼠原位瘤：胰腺成瘤；尾靜脈注射成瘤。高脂高糖動物模型

卵巢切除致骨質(zhì)疏松大鼠模型。湖南豚鼠動物模型構(gòu)建

導(dǎo)師給我們上的堂課往往就是交代我們要詳細(xì)記好實驗記錄，只要是和實驗相關(guān)的，無論是照片，還是文字，必須要及時事無巨細(xì)地詳細(xì)記錄。并且要備份好每一份實驗記錄。我個人一般喜歡每天及時地記在「科研實驗記錄本」上面，然后拍照掃描成電子版儲存在電腦和云端。時間規(guī)劃首先，個人是不贊同每天24小時泡在實驗室的，高效率是關(guān)鍵。建議提前一天規(guī)劃好第二天需要做的事情，按照代辦事項的格式逐條列出，哪一個時間段需要做什么事情？這樣的好處有兩點，一個是自己提前把時間預(yù)約好，可以留出足夠的時間休息和娛樂；另一個是在執(zhí)行計劃的時候往往會有一種時間緊迫感，辦事起來往往更高效且不會遺漏?？傊?，預(yù)實驗就是迷你版正式實驗，希望小伙伴們在進(jìn)行預(yù)實驗的時候一定要盡可能地準(zhǔn)備周全，這樣才能快的推進(jìn)正式實驗。湖南豚鼠動物模型構(gòu)建