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糖原染色:方法固定液Carnoy固定液:純酒精60ml冰醋酸10ml氯仿30ml,也可以選用75%酒精配制1)過(guò)碘酸酒清夜配法:過(guò)碘酸(HIO.2HO)0.4g95%酒精35mlM/5醋酸鈉(2.72g+蒸餾水100ml)5ml蒸餾水10ml保存于冰箱內(nèi),用棕色瓶,可用兩周.2)Schiff氏液:0.5克堿性品紅加入100毫升蒸餾水中,時(shí)時(shí)搖動(dòng)三角瓶5分鐘,使之充分溶解.冷卻至50℃后過(guò)濾加入10毫升1N鹽酸.冷卻至25℃,加入0.5-1克偏重硫酸鈉,在室溫中至少靜置24小時(shí),然后密封冰箱保存.3)Schiff氏酒配置Schiff氏液11.5ml1NHCI0.5ml純酒精23ml4)亞硫酸水1%偏重亞硫酸蒸餾水180ml的樹(shù)膠溶解適用于教學(xué)和科研上的核染色質(zhì)染色,也可用于黏蛋白染色(如軟骨的黏多糖)。江蘇品牌糖原染色試劑盒廠家供應(yīng)

糖原染色在使用過(guò)程中需要注意以下幾個(gè)方面:Schiff氏染液的配制是關(guān)鍵,尤其是偏重亞硫酸鈉的質(zhì)量,打開(kāi)應(yīng)是粉劑,且?guī)в辛虻臍馕叮舫蓤F(tuán)或沒(méi)有氣味,則不能用,配制時(shí)使用的容器、藥勺、稱(chēng)藥天平與稱(chēng)藥紙等必須潔凈、無(wú)污染。新配制好的Schiff劑為無(wú)色透明液體[1],配好后可分成小份置于-20℃保存,用時(shí)取一份恢復(fù)到室溫即可。沈洪武等通過(guò)對(duì)比染色發(fā)現(xiàn),冷凍保存1年的Schiff液的染色結(jié)果與新鮮配制的染色結(jié)果一致[5]。0.5%~1%高碘酸(pH值在3.0~5.0之間),環(huán)境溫度以不高于20℃為宜,室溫高時(shí)氧化時(shí)間適當(dāng)縮短;如果染色時(shí)環(huán)境溫度較高且高碘酸作用時(shí)間長(zhǎng),可使某些物質(zhì)成分發(fā)生非特異反應(yīng),使染色結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性。因此,室溫較高時(shí)可適當(dāng)縮短反應(yīng)時(shí)間。福建哪家提供糖原染色試劑盒廠家供應(yīng)應(yīng)該盡可能割取生活著的組織塊,并隨即投入固定液。

糖原染色在使用過(guò)程中需要注意以下幾個(gè)方面:盡可能選取小塊新鮮組織及時(shí)固定。糖原易溶于水,在酶的作用下很容易分解葡萄糖,更易溶于水,固定之前決不能用水或生理鹽水等浸洗。應(yīng)避免用水溶性固定液,宜采用酒精性固定液,如Carnoy液,能較好地保存糖原,但有使糖原流動(dòng)到細(xì)胞一側(cè)的現(xiàn)象,多數(shù)人認(rèn)為是由于固定劑把細(xì)胞內(nèi)的糖原推向固定劑對(duì)組織浸透的方向而造成。其他組織應(yīng)用中性福爾馬林固定為佳。組織在4℃左右溫度內(nèi)固定與保存,是針對(duì)糖的性質(zhì)和避免糖原溶于水而采取的相應(yīng)措施。乙醇能沉淀白蛋白、球蛋白,亦能**白和糖原沉淀,但仍可溶于水,因此較好不單獨(dú)使用乙醇固定,以乙醇為溶劑的混合固定液固定為佳
試劑盒:JC-1是一種陽(yáng)離子脂質(zhì)熒光染料,可作為檢測(cè)線粒體跨膜電位指示劑。JC-10染料是JC-1染料的升級(jí),有著更很好的水溶性以及染料穩(wěn)定性。原理:JC-1染料在正常細(xì)胞內(nèi)聚集在線粒體內(nèi),形成多聚體,發(fā)紅色熒光;而在凋亡細(xì)胞內(nèi),由于線粒體膜電位的破壞,不能聚集到線粒體內(nèi),以單體的形式存在于胞質(zhì)內(nèi)發(fā)綠色熒光。JC-1有單體和多聚體兩種存在狀態(tài),在低濃度時(shí)以單體的形式存在,高濃度時(shí)以多聚體形式存在,兩者的發(fā)射光譜不同,但均可在流式細(xì)胞儀綠色(FL-1)通道檢測(cè)出綠色熒光,JC-1可透過(guò)正常細(xì)胞膜以單體狀態(tài)聚集胞內(nèi)??蓪⒁让赶蠹?xì)胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止進(jìn)一步的損傷。

糖原染色(PAS):(1)原理:過(guò)碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化,生成醛基。醛基與雪夫液中的無(wú)色品紅結(jié)合,形成紫色化合物,定位于細(xì)胞質(zhì)中。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分鐘,流水沖洗,晾干。滴加過(guò)碘酸溶液作用20分鐘,流水沖洗,晾干。滴加雪夫液作用60分鐘,流水沖洗,晾干。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘,流水沖洗,晾干鏡檢。(4)臨床意義:根據(jù)染色陽(yáng)性程度和陽(yáng)性物形態(tài)鑒別主要用于急性淋巴細(xì)胞白血病和急性非淋巴細(xì)胞白血病鑒別,還有助于紅白血病與巨幼細(xì)胞貧血和溶血性貧血的鑒別診斷。切取的材料應(yīng)小而薄,便于固定液迅速滲入內(nèi)部。北京提供糖原染色試劑盒量大從優(yōu)
糖原染色顯示在肝或心肌細(xì)胞內(nèi)有大量糖原存在即可確診。江蘇品牌糖原染色試劑盒廠家供應(yīng)
PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1實(shí)驗(yàn)材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標(biāo)本各30例,均來(lái)自我室實(shí)驗(yàn)材料。1.2主要試劑1.2.1AAF固定液又稱(chēng)酒精醋酸福爾馬林混合固定液,其配方:無(wú)水乙醇80mL,冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL,冰醋酸100mL,95%酒精600mL。1.2.3過(guò)碘酸溶液0.5g過(guò)碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,或者按如下配方配制:過(guò)碘酸0.8g,95%乙醇70mL,醋酸鈉0.27g,水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4無(wú)色品紅液(Schiff氏液)在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL,煮沸后,在保持微沸的情況下,加入堿性品紅2.5g,并不斷搖動(dòng)約5min(勿使之沸騰),使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色)。冷卻到50℃時(shí),過(guò)濾,加入1N鹽酸50mL,再待冷卻至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉2.5g,塞住瓶口,搖動(dòng)容器以充分混合(此時(shí)顏色明顯變淡),然后避光放置或冰箱內(nèi)24h。江蘇品牌糖原染色試劑盒廠家供應(yīng)