經(jīng)典Trizol法并不能獲得總RNA：這個事實可能會刷不少新手甚至老手的三觀，但確有實驗支持：經(jīng)典Trizol法會選擇性丟失低GC比的miRNA。這一點，源自一則作者自撤稿的故事。V.NarryKim是韓國鼎鼎大名的美女科學家，專做RNA相關(guān)的研究，包括miRNA。幾年前她們組發(fā)現(xiàn)一個奇怪的“現(xiàn)象”，即貼壁細胞在消化之后，會有一些miRNA的豐度突然降低，看起來好像是被快速“降解”掉了，并據(jù)此寫了一篇文章發(fā)到MolecularCell上。但很快她們就發(fā)現(xiàn)，這個“現(xiàn)象”難以重復(fù)：如果用Trizol做實驗，就一定是陽性結(jié)果，而用試劑盒提RNA，就重復(fù)不出來。難道是號稱能提總RNA的Trizol方案出了問題？確實如此。經(jīng)進一步實驗后發(fā)現(xiàn)，經(jīng)典的Trizol方案會使得低GC比的miRNA丟失?？俁NA提取試劑：自備新開封或?qū)ｉT氯仿，異丙醇，75%乙醇，DEPC處理水。南京正規(guī)RNA提取試劑供應(yīng)商

RNA提取試劑注意事項：1、需自備氯仿，異丙醇，DEPC，75%乙醇(DEPC水配制)，和DEPC水。2、所有離心管，泵頭及相關(guān)溶液都必須無RNA酶污染。耐高溫器物可150℃烘烤4小時以去除RNA酶，其它器物去除RNA酶可考慮用0.01%的DEPC水浸泡過夜，然后滅菌，烘干。溶液需用DEPC水配制。加0.01%(體積比)diethylpyrocarbonate(DEPC)至重蒸水或MiliQ級水中，處理過夜，滅菌即成DEPC水。3、使用凍存的細胞或組織抽提總RNA的效果通常比新鮮的細胞或組織差一些。因為在細胞或組織凍融過程中一些細胞或組織內(nèi)的RNase會被釋放出來并剪切樣品。如果不能及時抽提RNA，推薦先加入適量TRIReagent，并裂解樣品后凍存。南京正規(guī)RNA提取試劑供應(yīng)商RNA提取試劑注意事項：溶液需用DEPC水配制。

RNA提取真正需要注意的要點：你的植物組織樣本采樣、保存正常嗎？組織裂解充分了嗎？組織起始量是否過大？起始量過大的話，他們得帶進去多少RNase呀，導(dǎo)致裂解液不能充分壓制內(nèi)源性的RNase，失敗就在預(yù)料之中！你的細胞活性好嗎？細胞都到衰亡期了，你提什么RNA呀；細胞加的那么多，破壁不充分，怎么裂解的好呢，他們本身得帶進去多少內(nèi)源性RNase污染呀！轉(zhuǎn)移液體時吸到沉淀了嗎？吸水相時碰到中間層了嗎？乙醇干燥凈了嗎？裂解樣本的過程是重中之重液氮研磨（手工）：要先加液氮預(yù)冷一下研缽，然后研磨，研磨過程要保證研缽中一直有少量液氮，研磨完成一個樣本后，直接加入裂解液渦旋震蕩后放常溫，或者直接丟到液氮中，全部研磨后一起加裂解液。液氮研磨（研磨儀）：研磨模塊丟到液氮中預(yù)冷，直到?jīng)]有氣泡冒出視為預(yù)冷完畢。在2ml圓底離心管（不需要無酶管，液氮研磨中不破裂就好）中加入5mm鋼珠一粒，放進樣品，投入液氮中預(yù)冷。把所有預(yù)冷好的離心管**研磨模塊中，放進研磨機震蕩20-30秒。完成后馬上加裂解液，渦旋。RNA提取試劑銷售廠家總共可以使用該試劑盒進行50次標準提取。

石蠟包埋組織RNA快速提取試劑盒（離心柱型）：原理簡介：改進的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細胞和滅活RNA酶，然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜，再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟，漂洗液將細胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除，較后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA（RNA）從硅基質(zhì)膜上洗脫。試劑盒特點：1、離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進口世界有名公司特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異極小，可重復(fù)性好?？朔藝a(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。2、結(jié)合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩(wěn)定性好，純度高和離心柱方便快捷的優(yōu)點，不需要異丙醇沉淀和乙醇洗滌過程，RNA可以直接從離心柱上洗脫避免了過度干燥不易溶解問題。3、獨有的MRL裂解液配方，可以有效的消除基因組污染。4、多次漂洗去蛋白過程，提取RNA純度更高~RNA提取試劑注意事項：如皮膚接觸TRIReagent，請立即用大量去垢劑和水沖洗。

眾所周知，RNA提取是一項困難的工作。常見的挑戰(zhàn)包括RNA降解、低產(chǎn)率和/或純度以及DNA污染。此外，不同的樣品類型有自己獨特的特性，需要特別注意。例如，微生物(如革蘭氏陽性/陰性細菌、菌類、古生菌等)的細胞壁堅硬，不易被化學和酶解。其他樣本類型，如糞便和植物含有壓制劑(如多酚類、腐殖酸/黃腐酸、單寧酸等)，可與RNA共沉淀，并可壓制下游分析，如RT-qPCR。RNA是不穩(wěn)定的，極易降解。許多樣品含有高水平的RNase，會快速降解RNA。為了使之較小化，較好在采集時穩(wěn)定樣本中的RNA。常用的樣品穩(wěn)定方法包括液氮快速冷凍、干冰乙醇浴或-80°C冷凍室。然而，這些方法也有缺點，如核酸的凍融損傷，并不是所有的研究人員在采集樣品時都能立即使用這些方法。拭子RNA提取試劑的選擇？產(chǎn)品價格。昆明正規(guī)RNA提取試劑產(chǎn)品介紹

植物花總ＲＮＡ提取試劑盒：采用進口硅基質(zhì)膜制作的總RNA吸附柱，配合特殊的提取緩沖液。南京正規(guī)RNA提取試劑供應(yīng)商

血漿/血清中miRNA提取試劑盒：是專門針對血清、血漿樣本中miRNA提取而開發(fā)的，利用吸附柱法從血清、血漿樣品中簡單快捷提取高純度高質(zhì)量的miRNA。該試劑盒中的裂解液miRBP1及柱結(jié)合液miRBP2具有高效裂解及提取效果。試劑盒中的吸附柱采用特殊的硅基質(zhì)膜材料，對RNA尤其是smallRNA（<200nt）具有結(jié)合能力，與常用的抗凝劑（包括肝素、EDTA、檸檬酸鈉、草酸鈉）兼容，得到的miRNA可直接用于RT-PCR和Northern雜交等后續(xù)分子生物學實驗操作。普通植物總ＲＮＡ提取試劑盒：采用進口硅基質(zhì)膜制作的總RNA吸附柱，可以從普通植物的根、莖、葉中快速提取總RNA，30~40分鐘內(nèi)即可完成提取過程，提取的總RNA純度高，沒有DNA和蛋白質(zhì)的污染，適用于RT-PCR、qRT-PCR、芯片分析、Northernblot雜交等實驗。總RNA吸附柱保證RNA提取速度快，提取效率高。高效去除植物組織中的色素、酚類等雜質(zhì)，提取RNA的純度高，產(chǎn)量大南京正規(guī)RNA提取試劑供應(yīng)商