游離RNA(或稱循環(huán)RNA,cell-freeRNA,簡稱cfRNA),即存在于細胞外的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,包括mRNA和RNA,在人的多種體液中被普遍研究并成為疾病無創(chuàng)性診斷和研究的新分子標(biāo)志物。文獻總結(jié)了以下兩個方面,一方面游離RNA主要來源于tumour細胞,另一方面tumour細胞來源有凋亡、壞死、主動釋放三種機制,目前認為以凋亡為主。游離RNA的生物學(xué)特征:游離RNA的結(jié)構(gòu)RNA相對DNA而言,更易被普遍存在的核糖核酸酶所降解,而且病癥患者血清中含有更高濃度的核糖核酸酶,病癥患者血清中以RNA-蛋白脂復(fù)合物化學(xué)組成來保護RNA,半衰期大約為2天。本試劑盒采用獨特的配方和添加劑,能高效的分離血清、血漿及其它無細胞體液等樣品中分離出游離的RNA,另外本試劑還可以有效地壓制各種外源性和內(nèi)源性的RNA酶,同時結(jié)合特制的純化柱,能較大限度的保持RNA的完整性、高得率以及純度,并能保留小RNA,為需要進行小RNA研究,如RNA的用戶提供了強有力的工具。血漿/血清RNA提取試劑盒:沒有DNA和蛋白質(zhì)的污染,適用于RT-PCR、qRT-PCR、芯片分析。徐州成都RNA提取試劑
RNA提取醇沉淀不是越多就越好。有些實驗方案會推薦,在異丙醇沉淀后,用乙醇沉淀兩次。實際上,任何提取實驗,都會在純度和得率這一對矛盾中取舍。醇沉淀會將脂溶性雜質(zhì)去掉,但部分非脂溶性的雜質(zhì)依然會連同RNA一起被沉淀下來。因此,多整幾次,并不會讓RNA的純度翻倍,反而還會有降低得率的風(fēng)險。一般情況下,異丙醇和乙醇各沉淀一次即可。但是,倘若預(yù)計RNA濃度很低,那就只能放棄純度,在低溫沉淀數(shù)小時,以換來較高的得率。圍繞DEPC的玄學(xué)。許多實驗方案會推薦使用0.1%DEPC處理RNA相關(guān)用水,以滅活RNase。這一點是要肯定的。不過,在使用DEPC的過程中,又充斥著一些玄學(xué)。高壓滅菌后的DEPC水,會有一股“香甜”的味道。許多人會以為那是殘留的DEPC而不敢用。實際上,這只是DEPC分解成CO2和乙醇后,產(chǎn)生的一些揮發(fā)性酯類副產(chǎn)物。武漢RNA提取試劑產(chǎn)品介紹總RNA提取試劑,適用于動植物細胞或組織及細菌的總RNA抽提,可有效防止RNA在提取過程中的降解。
總RNA提取試劑是廣譜型總RNA提取試劑。實驗操作快速方便,顏色鮮明,便于分層。本試劑適用范圍普遍,可以從動物組織、植物材料、各種微生物及培養(yǎng)細胞等樣品中提取總RNA。該方法對少量的組織(50-100mg)和細胞(5×106)以及大量的組織(≥1g)和細胞(>107)均有較好的分離效果。樣品在總RNA提取試劑中被充分裂解的同時能夠較大限度地保證RNA的完整性。在加入氯仿離心后,溶液會分成三層:上層無色水相、中間層和下層紅色有機相,RNA分布在上清層中。收集上清層后,經(jīng)異丙醇沉淀便可以回收得到總RNA。提取的總RNA完整性好,無蛋白和DNA污染,可用于各種分子生物學(xué)常規(guī)實驗,如RT-PCR、Real-timeRT-PCR、Northernblot、DotBlot、體外翻譯等。
RNA極速提取試劑盒:本試劑盒采用獨特的裂解液,可快速可靠從組織、細胞、抗凝全血、病毒液樣本中純化出高純度的總RNA。該RNA提取試劑盒是目前國際上操作步驟較少、用時較短的RNA提取試劑盒。應(yīng)用本試劑盒提取的RNA可直接用于反轉(zhuǎn)錄、基因克隆、定量檢測、文庫構(gòu)建、雜交等多種分子生物學(xué)實驗。RNA極速提取試劑盒產(chǎn)品特點:1.用時較短:極強的裂解能力使得樣品瞬間裂解,組織細胞樣品可在5分鐘內(nèi)完成總RNA的提取。2.超高純度:該試劑盒采用柱式純化,獲取的RNAA260/A280為2.0~2.2,A260/A230為1.9~2.1。3.高質(zhì)量RNA:使用該試劑盒獲取的RNA完整性良好。4.使用安全:無需酚/氯仿抽提,減少了有毒有害物質(zhì)。5.操作極簡化:只需將樣品與裂解液A和B混合,經(jīng)一步掛柱和洗脫即可獲得高質(zhì)量總RNA。較佳方法是保證樣品完全裂解,但相同的裂解方案換了一個樣本可能就沒轍了。
RNA提取試劑的選擇:首先,要確定材料的可用性。盡管現(xiàn)有的RNA提取試劑都用壓制RNase的成分,但提取的材料仍需謹慎處理。提取的材料的新鮮度是獲取完整RNA的關(guān)鍵,但是由于種種原因無法立即從新鮮材料中提取RNA時,使用Takara公司的樣品保護劑SampleProtectorforRNA/DNA可以免去使用液氮或超低溫冰箱的不便,同時也可以有效解決組織、細胞樣品的短時間保存及運輸問題。此外,如果將不同時期收集的樣品都預(yù)先存放于本試劑中,可以做到立即終止并固定RNA表達的時序變化,減少實驗組間的誤差~普通的提取實驗用國產(chǎn)的試劑盒就足以,價格不高,基本上各地均有現(xiàn)貨。上海RNA提取試劑進貨價
植物RNA提取試劑:操作簡單,提取迅速,溶液毒性小,實驗安全。徐州成都RNA提取試劑
通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒1、高純度:試劑盒的進口吸附柱具有的專一吸附特性和強吸附力。三管齊下保證所提取RNA的產(chǎn)量和純度,前期得到的高質(zhì)量RNA才能保證后續(xù)實驗成功,尤其是對熒光定量PCR實驗等。2、無DNA污染可直接用于熒光定量PCR:目前市面上的試劑盒大多提出的RNA會出現(xiàn)DNA污染其結(jié)果嚴重影響后續(xù)實驗,特別是非常靈敏的熒光定量PCR的實驗。一些市面上單獨賣的去DNA污染的試劑,效果不穩(wěn)定,去除DNA污染不徹底。本產(chǎn)品操作簡單,去除DNA徹底,得到的RNA樣品可直接用于熒光定量PCR,反轉(zhuǎn)錄等各種后續(xù)實驗。徐州成都RNA提取試劑