RNA提取濃度不高或質(zhì)量不佳原因及解決辦法：1、RNA降解：可能是提取樣本本身降解，或者是在提取過(guò)程中導(dǎo)致的降級(jí)；應(yīng)當(dāng)盡可能使用新鮮樣本進(jìn)行RNA提取，采集的樣本應(yīng)當(dāng)及時(shí)置于液氮或者-80℃冰箱凍存，并減少反復(fù)凍融。在RNA提取過(guò)程中應(yīng)當(dāng)使用RNase/DNasefree的吸頭、離心管及其他材料，提取過(guò)程盡可能的快，提取后的RNA應(yīng)置于冰盒上并及時(shí)放于-80凍存。如提取后的RNA需要進(jìn)行凝膠電泳檢測(cè)，則應(yīng)提取好后立刻進(jìn)行電泳，電泳緩沖液應(yīng)更換新配制的。2、鹽及有機(jī)溶劑殘留：提取試劑中含有酚及胍鹽，洗滌液中含有乙醇，在提取過(guò)程中裂解液吸棄不徹底，洗液沒(méi)有充分晾干導(dǎo)致的，殘留的鹽及有機(jī)溶劑對(duì)后續(xù)的逆轉(zhuǎn)錄和PCR均存在不同程度的壓制作用，因此在提取過(guò)程中應(yīng)充分去除組織裂解液，洗滌時(shí)應(yīng)充分，使管壁四周均能被洗滌到，另外管子空離和吹風(fēng)是必須的步驟，會(huì)進(jìn)一步降低有機(jī)物殘留。植物RNA提取試劑：采用高效、專(zhuān)一結(jié)合核酸的離心吸附柱和獨(dú)特的緩沖系統(tǒng)。徐州RNA提取試劑平均價(jià)格

眾所周知，RNA提取是一項(xiàng)困難的工作。常見(jiàn)的挑戰(zhàn)包括RNA降解、低產(chǎn)率和/或純度以及DNA污染。此外，不同的樣品類(lèi)型有自己獨(dú)特的特性，需要特別注意。例如，微生物(如革蘭氏陽(yáng)性/陰性細(xì)菌、菌類(lèi)、古生菌等)的細(xì)胞壁堅(jiān)硬，不易被化學(xué)和酶解。其他樣本類(lèi)型，如糞便和植物含有壓制劑(如多酚類(lèi)、腐殖酸/黃腐酸、單寧酸等)，可與RNA共沉淀，并可壓制下游分析，如RT-qPCR。RNA是不穩(wěn)定的，極易降解。許多樣品含有高水平的RNase，會(huì)快速降解RNA。為了使之較小化，較好在采集時(shí)穩(wěn)定樣本中的RNA。常用的樣品穩(wěn)定方法包括液氮快速冷凍、干冰乙醇浴或-80°C冷凍室。然而，這些方法也有缺點(diǎn)，如核酸的凍融損傷，并不是所有的研究人員在采集樣品時(shí)都能立即使用這些方法。重慶RNA提取試劑價(jià)格RNA提取試劑：在破碎和溶解細(xì)胞時(shí)能保持RNA的完整性。

經(jīng)典Trizol法并不能獲得總RNA：這個(gè)事實(shí)可能會(huì)刷不少新手甚至老手的三觀，但確有實(shí)驗(yàn)支持：經(jīng)典Trizol法會(huì)選擇性丟失低GC比的miRNA。這一點(diǎn)，源自一則作者自撤稿的故事。V.NarryKim是韓國(guó)鼎鼎大名的美女科學(xué)家，專(zhuān)做RNA相關(guān)的研究，包括miRNA。幾年前她們組發(fā)現(xiàn)一個(gè)奇怪的“現(xiàn)象”，即貼壁細(xì)胞在消化之后，會(huì)有一些miRNA的豐度突然降低，看起來(lái)好像是被快速“降解”掉了，并據(jù)此寫(xiě)了一篇文章發(fā)到MolecularCell上。但很快她們就發(fā)現(xiàn)，這個(gè)“現(xiàn)象”難以重復(fù)：如果用Trizol做實(shí)驗(yàn)，就一定是陽(yáng)性結(jié)果，而用試劑盒提RNA，就重復(fù)不出來(lái)。難道是號(hào)稱(chēng)能提總RNA的Trizol方案出了問(wèn)題？確實(shí)如此。經(jīng)進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)后發(fā)現(xiàn)，經(jīng)典的Trizol方案會(huì)使得低GC比的miRNA丟失。

拭子RNA提取試劑的選擇？操作簡(jiǎn)便性。操作簡(jiǎn)便性也是拭子RNA提取試劑選擇的一個(gè)重要因素。操作過(guò)于復(fù)雜，不光費(fèi)時(shí)費(fèi)力，還容易導(dǎo)致樣本間的交叉污染，也容易損失樣本。特別是用于臨床檢測(cè)或樣本量較多情況下的檢測(cè)，操作復(fù)雜如果導(dǎo)致交叉污染會(huì)引起誤診，還會(huì)影響出檢測(cè)報(bào)告的時(shí)間。因而，選用操作簡(jiǎn)便、流暢的提取試劑盒非常重要。就我們?cè)?jīng)用過(guò)的以上三種提取試劑盒來(lái)說(shuō)，Q公司的拭子RNA提取試劑盒提取過(guò)程大約25min，從樣本處理開(kāi)始需要10個(gè)步驟；T公司拭子RNA提取試劑盒整個(gè)提取過(guò)程需要1個(gè)多小時(shí)，從樣本開(kāi)始處理10個(gè)步驟；B公司的Biog拭子RNA提取試劑盒提取過(guò)程大約20min，從樣本開(kāi)始處理7個(gè)步驟，B公司的拭子RNA提取試劑盒在操作簡(jiǎn)便性上具有一定優(yōu)勢(shì)，更適合于較多樣本的檢測(cè)。據(jù)了解，該產(chǎn)品已通過(guò)藥監(jiān)局備案，也更適合臨床樣本的檢測(cè)。為了提高裂解效果，可以將裂解緩沖液與機(jī)械裂解步驟（研磨珠破碎）匹配。

RNA提取試劑TRIpure是基于世界上使用較普遍的異硫氰酸胍/酚法研制而成的總RNA抽提試劑。在破碎和溶解細(xì)胞時(shí)能保持RNA的完整性。無(wú)論是人、動(dòng)物、植物還是細(xì)菌組織，該方法對(duì)少量的組織(50-100mg)和細(xì)胞(5×106)以及大量的組織(≥1g)和細(xì)胞(>107)均有較好的分離效果。TRIpure試劑操作上的簡(jiǎn)單性允許同時(shí)處理多個(gè)樣品，所有的操作可以在一小時(shí)內(nèi)完成。TRIpure抽提的總RNA能夠避免DNA和蛋白的污染，故而能夠作RNA印跡分析、斑點(diǎn)雜交、poly(A)+選擇、體外翻譯、RNA酶保護(hù)分析和分子克隆等。和進(jìn)口品牌實(shí)驗(yàn)對(duì)照顯示，公司的產(chǎn)品質(zhì)量已經(jīng)達(dá)到甚至超過(guò)了進(jìn)口產(chǎn)品的質(zhì)量。總RNA提取試劑：適用范圍普遍，可以從動(dòng)物組織。南京正規(guī)RNA提取試劑直銷(xiāo)價(jià)

RNA提取試劑注意事項(xiàng)：TRIReagent抽提總RNA的同時(shí)，理論上也可抽提蛋白和DNA。徐州RNA提取試劑平均價(jià)格

RNA提取試劑的選擇：首先，要確定材料的可用性。盡管現(xiàn)有的RNA提取試劑都用壓制RNase的成分，但提取的材料仍需謹(jǐn)慎處理。提取的材料的新鮮度是獲取完整RNA的關(guān)鍵，但是由于種種原因無(wú)法立即從新鮮材料中提取RNA時(shí)，使用Takara公司的樣品保護(hù)劑SampleProtectorforRNA/DNA可以免去使用液氮或超低溫冰箱的不便，同時(shí)也可以有效解決組織、細(xì)胞樣品的短時(shí)間保存及運(yùn)輸問(wèn)題。此外，如果將不同時(shí)期收集的樣品都預(yù)先存放于本試劑中，可以做到立即終止并固定RNA表達(dá)的時(shí)序變化，減少實(shí)驗(yàn)組間的誤差徐州RNA提取試劑平均價(jià)格