研究發(fā)現(xiàn),OCT 包埋劑會(huì)抑制 MALDI-MSI 分析中的離子形成,干擾數(shù)據(jù)分析。以未包埋的新鮮冰凍樣本為參照,對(duì) OCT 包埋、OCT 包埋后清洗和 CMC 包埋處理進(jìn)行系統(tǒng)性評(píng)估,發(fā)現(xiàn) OCT 包埋的**組織樣本特征離子檢出種類(lèi)明顯減少,不過(guò)經(jīng) PBS 清洗后,離子種類(lèi)抑制情況有所改善。這提示在進(jìn)行 MALDI-MSI 等質(zhì)譜分析時(shí),需特別注意 OCT 的干擾,可通過(guò)優(yōu)化清洗步驟或選擇替代包埋劑來(lái)提高分析的準(zhǔn)確性,為**標(biāo)志物的篩選提供更可靠的數(shù)據(jù)。進(jìn)一步研究表明,清洗時(shí)的溫度和時(shí)間也會(huì)影響干擾去除效果,37℃溫水清洗 5 分鐘比室溫清洗更能有效降低 OCT 的殘留量。角膜研究離不開(kāi)OCT包埋技術(shù)的應(yīng)用。江蘇進(jìn)口OCT包埋劑咨詢(xún)報(bào)價(jià)
組織在進(jìn)行 OCT 包埋前的取材和處理直接影響包埋質(zhì)量。取材時(shí)需使用鋒利的解剖刀,盡可能保持組織的完整性,避免過(guò)度擠壓、牽拉導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞,取材后應(yīng)在 30 分鐘內(nèi)盡快進(jìn)行包埋,若不能及時(shí)包埋,需將組織放入 - 80℃超低溫冰箱中短暫保存。對(duì)于較大的組織,如直徑超過(guò) 1cm 的**組織,可沿橫截面切成 0.3cm 左右的小塊,以保證凍結(jié)均勻,包埋時(shí)要將組織的待觀察面朝下放置在包埋模的**位置,確保切片時(shí)能順利獲得所需的組織切面,減少無(wú)效切片。江蘇進(jìn)口OCT包埋劑咨詢(xún)報(bào)價(jià)特殊染色結(jié)合OCT包埋切片分析眼部病變。
利用 OCT 包埋劑制作的冷凍切片在染色過(guò)程中有注意事項(xiàng)。由于 OCT 包埋劑是水溶性的,在進(jìn)行染色前的漂洗步驟時(shí),需將載玻片傾斜 45°,用滴管沿載玻片邊緣緩慢滴加 PBS 緩沖液,讓液體自然流過(guò)組織切片,控制好水流速度和時(shí)間,一般漂洗 3 次,每次 3 分鐘,避免水流過(guò)大將組織切片沖掉。同時(shí),染色試劑的選擇也很重要,要提前查閱試劑說(shuō)明書(shū),確保染色試劑不會(huì)與 OCT 包埋劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng),如某些含重金屬的染色劑可能會(huì)與包埋劑成分結(jié)合產(chǎn)生沉淀,影響染色結(jié)果的判讀,染色后要及時(shí)用中性樹(shù)膠進(jìn)行封片處理,防止切片干燥褪色。
新手使用 OCT 包埋劑時(shí)常出現(xiàn)包埋劑用量不足的問(wèn)題,導(dǎo)致組織邊緣暴露,切片時(shí)易破碎。建議滴加時(shí)讓包埋劑超出組織邊緣 1-2mm,形成足夠的支撐邊框,同時(shí)避免氣泡產(chǎn)生,若發(fā)現(xiàn)氣泡可用針頭輕輕挑破,保證包埋的完整性。在包埋小組織塊(如小鼠的脾臟、淋巴結(jié))時(shí),可先用少量 OCT 在樣本托上固定組織位置,防止組織在包埋劑凝固前移位,待初步固定后再補(bǔ)充包埋劑覆蓋,這樣能顯著提高小組織包埋的成功率,減少因組織移位導(dǎo)致的切片失敗。OCT包埋讓眼科組織切片更易操作。
OCT 包埋劑在神經(jīng)科學(xué)研究中具有獨(dú)特價(jià)值。神經(jīng)組織尤其是腦組織,結(jié)構(gòu)精細(xì)且易受損,含有大量的神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,以及復(fù)雜的突觸連接,傳統(tǒng)包埋方法易導(dǎo)致神經(jīng)元變形、突觸斷裂。OCT 包埋能在低溫下快速固定神經(jīng)組織,很大程度保留神經(jīng)元的形態(tài)、突觸結(jié)構(gòu)以及神經(jīng)遞質(zhì)如多巴胺、乙酰膽堿等成分,為研究阿爾茨海默病、帕金森病等神經(jīng)退行性疾病的病理變化,以及腦損傷后的修復(fù)機(jī)制等提供了高質(zhì)量的組織切片樣本。研究人員通過(guò)對(duì) OCT 包埋的腦組織切片進(jìn)行尼氏染色、免疫熒光染色等,可清晰觀察到神經(jīng)細(xì)胞的形態(tài)和分布變化。角膜層狀結(jié)構(gòu)經(jīng)OCT包埋后清晰可見(jiàn)。河北O(jiān)CT包埋劑銷(xiāo)售方法
眼科組織切片質(zhì)量因OCT包埋而提高。江蘇進(jìn)口OCT包埋劑咨詢(xún)報(bào)價(jià)
自動(dòng)化冷凍切片機(jī)與 OCT 包埋劑的配合使用能提高實(shí)驗(yàn)效率。自動(dòng)化設(shè)備如 Leica CM1950 可通過(guò)程序精確控制冷凍溫度在 ±0.5℃范圍內(nèi),切片厚度可在 1-100μm 之間精確調(diào)節(jié),與 OCT 包埋劑在特定溫度下的物理特性相匹配,能實(shí)現(xiàn)連續(xù)、穩(wěn)定的切片,每小時(shí)可完成 200-300 張切片,**超過(guò)手動(dòng)切片的效率。同時(shí),自動(dòng)化操作減少了人為操作帶來(lái)的誤差,如切片厚度不均、組織脫落等問(wèn)題,特別適合需要大量切片的實(shí)驗(yàn),如藥物篩選中的組織病理學(xué)檢查,同時(shí)保證了切片質(zhì)量的均一性,有利于后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可比性分析。江蘇進(jìn)口OCT包埋劑咨詢(xún)報(bào)價(jià)