靜置25分鐘后把酒精倒干,用吸水紙吸出多余的酒精,然后配壓縮膠,同樣的操作,關鍵是梳子要插得快,要小心梳子下產(chǎn)生氣泡,然后靜置30分鐘。如果是當天跑膠,我會等上層膠凝2個小時再用,但要注意防干燥縮水,可以在一個小時的時候沿著梳子上緣加點電泳液。所以我一般提前一晚制膠,泡于純水或者電泳液里置于4度冰箱暫存。三、蛋白電泳1、上樣前準備把膠組裝到電泳芯上,注意密閉性(否則漏液),如果內(nèi)槽漏液就不是勻強電場了,條帶可能就不是一條直線。然后內(nèi)槽倒?jié)M電泳液,拔梳子,這一步要小心,梳子要兩邊一起緩緩往上拔出,然后觀察泳道內(nèi)有無脫落的膠粒或者膠絲,有的話用1毫升注射器吸出。然后從冰箱取出蛋白樣品,解凍。準備振蕩器。2、上樣和電泳注意,上樣后蛋白會開始慢慢在膠中彌散,所以上樣越快越好。我習慣先上蛋白Marker,再上蛋白樣品,蛋白上樣前確保樣品完全解凍和充分振蕩(推薦使用振蕩器振蕩),吸的時候沒有拉絲即可,建議上樣分鐘把樣品從冰上取出來,不然樣品中SDS可能會結晶析出,從而影響電泳效果。上層膠80V25分鐘,下層膠120V65分鐘。四、轉膜1、轉膜前準備我會在電泳結束0分鐘準備,把轉膜液配好置于4度冰箱預冷,然后裁膜,準備轉膜裝置。博萊霉素是具有多種抗腫瘤作用的多組分,其毒副作用之一是引起肺纖維化。兔動物模型飼養(yǎng)
角膜環(huán)鉆致角膜損傷兔模型一、服務信息1、動物模型名稱:角膜環(huán)鉆致角膜損傷兔模型2、實驗動物種屬:新西蘭兔3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:2~3月齡5、實驗動物體重:6、實驗動物環(huán)境:SPF級二、服務項目服務編號服務內(nèi)容服務周期價錢DH2021角膜環(huán)鉆致角膜損傷兔模型5周詢價1、實驗方法:角膜環(huán)鉆致兔角膜機械性損傷。耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉聯(lián)合肌肉注射速眠新Ⅱ進行兔麻醉。環(huán)鉆前先用2%硼酸溶液沖洗雙眼,再滴**2滴消毒,以保持結膜清潔。開瞼,滴2%利多卡因滴眼液2滴行角膜表面麻醉,用已滅菌的6mm角膜環(huán)鉆分別在兔眼角膜上作環(huán)切,并滴入2滴氯霉素眼**潤洗,用顯微眼鑷、角膜上皮鏟和精細眼剪小心去掉角膜損傷區(qū)域上皮,術畢,滴氯霉素眼**2滴。2、檢測標準:肉眼或裂隙燈下觀察到角膜有損傷。三、交付標準:1.提供動物模型構建過程中的原始實驗記錄及數(shù)據(jù)圖片。2.根據(jù)要求提供構建成功的模型動物或相關組織材料。四、服務項目說明:1、如有特殊要求,請另詢價。2、雙方簽訂合同后,收取70%首付后啟動實驗。北京兔動物模型服務在肝臟中,肝外膽道系統(tǒng)的阻塞會引發(fā)膽汁淤積和炎癥,導致門靜脈周圍區(qū)域的強烈纖維化反應。
脂多糖致膿毒血癥肝損傷小鼠模型【方法】1、小鼠稱重,按體重計算藥物用量。2、脂多糖(LPS)藥物配制,生理鹽水溶解,根據(jù)小鼠體重配制終濃度為10mg/kg,200ul/只腹腔注射使用。3、抓取小鼠,捏緊小鼠頸背部皮膚,小拇指無名指疊加固定小鼠左下肢充分暴露小鼠腹部。4、小鼠的頭部向下,這樣腹腔中的就會自然倒向胸部,防止注射器刺入時損傷腸道。進針的動作要輕乘,防止刺傷腹部。5、注射器吸取準備好的藥物,腹腔左下部與身體呈45度角左右斜角進針注射LPS,注射完藥物后,輕微旋轉針頭退針,防止漏液。6、造模18h后處死小鼠解剖取組織進行組織病理學檢查?!緳z測】肝組織有無:1、肝水腫;2、肝出血;3、炎性細胞浸潤;4、肝組織腫大等病理改變。再觀察肝損傷程度,各按程度積分為:0分為無該項病理改變;1分為病理變化輕且很局限;2分為病理變化中等且局限;3分為病變中等但或局部很;4分為非常的理改變。求出各動物的各項病理改變的總和,作為肝損傷程度積分。
輕微的接觸角膜的中心頂端。一通道正極接右眼,二通道正極接左眼。通過針管對雙眼滴生理鹽水,改善金環(huán)電極及角膜的接觸效果。保證兩個金環(huán)電極以相同的角度、方式接觸兩眼角膜中心正端的相同位置。5記錄示波信號確認無誤后,關閉暗紅光??梢韵葒L試記錄一下暗適應光強為·s/m2的erg檢測,確認一下信號的質(zhì)量:如果雙眼的振幅出現(xiàn)了與預期不同的較大差異,建議再次檢查金環(huán)電極的安裝位置。然后依次記錄暗適應光強為·s/m2的信號。需要注意的是,完成暗適應·s/m2光強檢測后,系統(tǒng)將自動打開背景光。同樣的,需要打開定時器,光適應10-15分鐘,再記錄。6經(jīng)過光適應后,依次記錄光適應·s/m2以及·s/m2光強下波形,記錄·s/m2光強下閃爍視網(wǎng)膜誘發(fā)電位。結果發(fā)現(xiàn)在4個月時,與ctrl(對照)小鼠比較,cko(gm20541基因敲除純合子小鼠)小鼠的a波和b波在暗適應和光適應條件下均明顯降低,表明gm20541敲除后導致視力受損(見圖5和圖6)。實施例4視網(wǎng)膜石蠟切片h&e染色:對4月齡小鼠的視網(wǎng)膜進行石蠟切片、蘇木精-伊紅染色法(h&e染色方法)染色,具體操作如下:1)快速取小鼠眼球組織,并置于固定液中固定24h;2)石蠟包埋,切片,厚度為4μm;3)切片常規(guī)用二甲苯脫蠟。控制原發(fā)病,遏制其誘導的全身失控性炎癥反應,是預防和ALI/ARDS的必要措施。
視網(wǎng)膜外網(wǎng)層及其他相關細胞層出現(xiàn)相應病理改變。因此,視網(wǎng)膜前體細胞中的gm20541基因被敲除的動物可以作為視網(wǎng)膜色素變性疾病模型,用于視網(wǎng)膜色素變性性疾病研究等領域中,為該疾病的研究例如發(fā)病過程、機制以及相關藥物的篩選提供一種新的模型。進一步地,在本發(fā)明的一些實施方案中,敲除gm20541基因序列是指敲除gm20541基因的外顯子序列。敲除gm20541基因序列可以是敲除gm20541基因全長序列,也可以是敲除gm20541基因部分序列例如部分外顯子序列,無論敲除那種類型(部分或全長)的序列,只要是能夠在前體細胞中沉默gm20541基因的表達,使動物表現(xiàn)出視網(wǎng)膜色素變性性疾病相應特征即落入本發(fā)明的保護范圍。進一步地,在本發(fā)明的一些實施方案中,所述外顯子序列選自第1外顯子、第2外顯子、第3外顯子中的任意一個或多個外顯子序列。在本發(fā)明公開的內(nèi)容基礎上,即在本發(fā)明揭示了gm20541基因與視網(wǎng)膜色素變性疾病的相關關系的前提下,本領域技術人員容易想到敲除gm20541基因的任意一個或多個外顯子序列,以使gm20541基因的功能受損,進而得到類似的視網(wǎng)膜色素變性疾病模型,此類方法,也是屬于本發(fā)明的保護范圍。進一步地,在本發(fā)明的一些實施方案中。建立SD大鼠頸動脈損傷(結扎套管)模型。兔動物模型飼養(yǎng)
脂多糖(LPS)聯(lián)合煙熏法致慢性阻塞性肺部疾病小鼠模型。兔動物模型飼養(yǎng)
用一次定量放血法可擺分之擺造成出血性休克,擺分之擺死亡,這就符合可重復性和達到了標準化要求。(三)可靠性復制的動物模型應該力求可靠地反映人類疾病,即可特異地、可靠地反映某種疾病或某種功能、代謝、結構變化,應具備該種疾病的主要癥狀和體征,經(jīng)化驗或X線照片、心電圖、病理切片等證實。若易自發(fā)地出現(xiàn)某些相應病變的動物,就不應加以選用,易產(chǎn)生與復制疾病相混淆的疾病者也不宜選用。(四)適用性和可控性供醫(yī)學實驗研究用的動物模型,在復制時,應盡量考慮到今后臨床應用和便于控制其疾病的發(fā)展,以利于研究的開展。(五)易行性和經(jīng)濟性在復制動物模型時,所采用的方法應盡量做到容易執(zhí)行和合乎經(jīng)濟條件原則。以上就是上海研錄為你分享的小知識,如果想要了解更多相關內(nèi)容,可與我們聯(lián)系,我們期待您的來電!兔動物模型飼養(yǎng)