在不同的鹽濃度條件下,AAV病毒載體的存在形式不同。低鹽濃度條件下,AAV病毒顆粒表面會通過電荷作用等非特異結(jié)合到HCD上,從而產(chǎn)生病毒顆粒團(tuán)聚現(xiàn)象。隨著溶液鹽濃度上升,AAV病毒顆粒與HCD的離子相互作用會被破壞,AAV病毒顆粒會逐漸解離。當(dāng)鹽濃度升到更高范圍(>400mM左右),AAV病毒顆粒與HCD的結(jié)合更弱,AAV顆粒更穩(wěn)定。因此,在高鹽濃度溶液中,AAV顆粒更加穩(wěn)定,且有數(shù)據(jù)表明高鹽濃度不會削弱AAV的侵染能力。所以,我們推薦提高AAV病毒生產(chǎn)中的鹽濃度。致力于從深海microbe中識別新的冷適應(yīng)酶,用于分子研究、IVD和biopharma領(lǐng)域。鎮(zhèn)江倍篤生物中鹽核酸酶工廠直銷
細(xì)胞基因藥物領(lǐng)域的進(jìn)展使得對高質(zhì)量基因轉(zhuǎn)移技術(shù)的需求急劇增加,包括高質(zhì)量慢病毒載體(LV)的大規(guī)模生產(chǎn)。宿主細(xì)胞DNA殘留(HCD)是一類主要的工藝相關(guān)雜質(zhì),對下游純化帶來很大挑戰(zhàn)。根據(jù)相關(guān)法規(guī)要求,需要去除HCD才能達(dá)到臨床級LV。HCD去除是通過核酸酶處理聯(lián)合下游工藝(DSP)共同實(shí)現(xiàn)的。文章作者研究了兩款核酸酶M-SAN HQ中鹽核酸酶(ArcticZymes Technologies)和Benzonase(Merck)對HCD去除效率的差別,其下游工藝包含過濾澄清及TFF超濾。江蘇70950-202中鹽核酸酶銷售電話在細(xì)胞培養(yǎng)液或收獲的培養(yǎng)上清中,不需調(diào)整任何組分,M-SAN HQ中鹽核酸酶即可表現(xiàn)較高核酸酶活性。
一般來說,生物生產(chǎn)工藝用的核酸酶以BenzonaseTM(BenzonaseTM是Merck的注冊商標(biāo))為主,能高效降解任何形式(雙鏈、單鏈、線狀、環(huán)狀)的DNA和RNA。該酶來自于大自然界普遍存在的S.Marcescen,通過E.coli發(fā)酵生產(chǎn)得到。該酶的適宜反應(yīng)條件是低鹽濃度范圍(<100mM鹽濃度),且酶活隨著鹽濃度上升而下降,在300mM鹽濃度時酶活幾乎喪失。對于細(xì)胞基因藥物常用的兩種病毒載體LV和AAV,LV由于含有脂包膜結(jié)構(gòu)一般都在生理鹽條件下存在,而AAV在高鹽條件下不易團(tuán)聚、更穩(wěn)定。而在生理鹽濃度及更高濃度條件下,Benzonase活性受到抑制。
ArcticZymes Technologies成立于20世紀(jì)80年代后期,總部位于挪威北部的特羅姆瑟(Troms?);立足北極海洋區(qū),致力于從海洋生物中識別新的冷適應(yīng)酶,用于分子研究、體外診斷和藥物領(lǐng)域。以其產(chǎn)品的獨(dú)特性質(zhì)及超過30年的生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)積淀,ArcticZymes Technologies得到國際分子診斷及生物藥物領(lǐng)域客戶的肯定及大力支持,ArcticZymes產(chǎn)品線已用于診斷產(chǎn)品及生物藥物生產(chǎn)中。2005年,ArcticZymes在Olso證券交易所上市,并且持續(xù)得到挪威國家基金的支持。南京中鹽核酸酶價格哪家好呢,歡迎咨詢上海倍篤生物 。
ArcticZymes廠家對鹽活性核酸酶系列產(chǎn)品(Salt Active Nucleases,SANs)的生產(chǎn)及質(zhì)控,包括SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶,在符合ISO13485:2016體系基礎(chǔ)上,增加了cGMP質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn),如microbes、endotoxin、蛋白酶等;同時提供TSE/BSE聲明、無動物源(Animal-Origin Free)聲明、非轉(zhuǎn)基因聲明等文件協(xié)助藥物申報。此外,ArcticZymes的生產(chǎn)場地接受客戶的定期審計,其第三方審計文件已得到國際TOP CDMO及Biotech的認(rèn)可,并已經(jīng)成為國際TOP CDMO的供應(yīng)商。具體文件體系可以跟廠家或?qū)?yīng)銷售人員聯(lián)系。M-SAN HQ ELISA kit檢測產(chǎn)品操作簡單,1.5–2hr即可完成檢測。甘肅綜合中鹽核酸酶用途
一般來說,生理鹽條件相當(dāng)于150mM NaCl溶液,而這正是中鹽核酸酶較為適合的條件。鎮(zhèn)江倍篤生物中鹽核酸酶工廠直銷
殘留的宿主DNA是生產(chǎn)中產(chǎn)生的雜質(zhì),其存在潛在的致瘤性、傳染性和免疫原性等風(fēng)險。相關(guān)研究表明,基因的大小普遍在200bp以上,因此大于200bp有可能會有一定的致病性,而且殘留DNA片段越大,生物制品的風(fēng)險等級越高。因此,各國監(jiān)管機(jī)構(gòu)對其提出了嚴(yán)格要求。美國食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)在《關(guān)于人類基因zhiliao新產(chǎn)品生產(chǎn)指導(dǎo)文件》中明確指出HCD的片段要小于200bp。2022年5月,國家藥品監(jiān)督管理局藥品評審中心(CDE)發(fā)布的《體內(nèi)基因藥物產(chǎn)品藥學(xué)研究與評價技術(shù)指導(dǎo)原則(試行)》中也明確指出需對DNA殘留量和殘留片段大小進(jìn)行控制,建議盡量將DNA殘留片段的大小控制在200bp以下。鎮(zhèn)江倍篤生物中鹽核酸酶工廠直銷