探針的標(biāo)記方式有放射性標(biāo)記和非放射性標(biāo)記。標(biāo)記物質(zhì)有放射性元素(如32P等)和非放射性物質(zhì)(如生物素、地高辛等)。32P是**常用的核苷酸標(biāo)記同位素,被標(biāo)記的dNTP本身就帶有磷酸基團(tuán),便于標(biāo)記。特點(diǎn)是比活性高,可達(dá)9000Ci/mmol;發(fā)射的β射線(xiàn)能量高。用它標(biāo)記的探針自顯影時(shí)間短,靈敏度高。32P的半壽期短,雖使用不方便,但為廢棄物的處理減輕了壓力。非放射性標(biāo)記法有酶標(biāo)法和化學(xué)物標(biāo)記法。酶標(biāo)方法與免疫測(cè)定ELISA方法相似,只是被標(biāo)記的核酸代替了被標(biāo)記的抗體,事實(shí)上被標(biāo)記的抗體也稱(chēng)為探針,現(xiàn)有許多商品是生物素、地高辛標(biāo)記的。電子探針主要由電子光學(xué)系統(tǒng)(鏡筒),X射線(xiàn)譜儀和信息記錄顯示系統(tǒng)組成。嘉定區(qū)質(zhì)量探針五星服務(wù)
基因探針,即核酸探針,是一段帶有檢測(cè)標(biāo)記,且順序已知的,與目的基因互補(bǔ)的核酸序列(DNA或RNA)?;蛱结樛ㄟ^(guò)分子雜交與目的基因結(jié)合,產(chǎn)生雜交信號(hào),能從浩瀚的基因組中把目的基因顯示出來(lái)。根據(jù)雜交原理,作為探針的核酸序列至少必須具備以下兩個(gè)條件:①應(yīng)是單鏈,若為雙鏈,必須先行變性處理。②應(yīng)帶有容易被檢測(cè)的標(biāo)記。它可以包括整個(gè)基因,也可以**是基因的一部分;可以是DNA本身,也可以是由之轉(zhuǎn)錄而來(lái)的RNA。DNA探針根據(jù)其來(lái)源有3種:一種來(lái)自基因組中有關(guān)的基因本身,稱(chēng)為基因組探針(genomic probe);另一種是從相應(yīng)的基因轉(zhuǎn)錄獲得了mRNA,再通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄得到的探針,稱(chēng)為cDNA探針(cDNA probe)。與基因組探針不同的是,cDNA探針不含有內(nèi)含子序列。此外,還可在體外人工合成堿基數(shù)不多的與基因序列互補(bǔ)的DNA片段,稱(chēng)為寡核苷酸探針。嘉定區(qū)質(zhì)量探針五星服務(wù)后期生產(chǎn)的儀器,可作X射線(xiàn)背散射照相、照相。
DNA探針可以用來(lái)診斷寄生蟲(chóng)病,現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查及蟲(chóng)種鑒定,可用于病毒性肝炎的診斷,遺傳性疾病的診斷,可用于檢測(cè)飲用水病毒含量。具體方法:用一個(gè)特定的DNA片段制成探針,與被測(cè)的病毒DNA雜交,從而把病毒檢測(cè)出來(lái)。與傳統(tǒng)方法相比具有快速、靈敏的特點(diǎn)。傳統(tǒng)的檢測(cè)一次,需幾天或幾個(gè)星期的時(shí)間,精確度不高,而用DNA探針只需一天。據(jù)報(bào)道,能從1t水中檢測(cè)出10個(gè)病毒來(lái),精確度**提高。RNA探針是一類(lèi)很有前途的核酸探針,由于RNA是單鏈分子,所以它與靶序列的雜交反應(yīng)效率極高。
(1)電子光學(xué)系統(tǒng)。電子束直徑0.1~1μm,電子束穿透深度1~3μm。被激發(fā)原子發(fā)射特征X射線(xiàn)譜過(guò)程如下:圍繞原子核運(yùn)動(dòng)的內(nèi)層電子,被電子束的電子轟擊后,其他外層電子為補(bǔ)充轟擊出的電子而發(fā)生躍遷,在躍遷過(guò)程中釋放出能量,即發(fā)射出X射線(xiàn)。(2)X射線(xiàn)譜儀。測(cè)量各種元素產(chǎn)生的X射線(xiàn)波長(zhǎng)和強(qiáng)度,并以此對(duì)微小體積中所含元素進(jìn)行定性和定量分析。特征X射線(xiàn)圖像顯像管的原理是:X射線(xiàn)束入射到一已知晶面間距的晶體上(X射線(xiàn)分光光度計(jì)的彎曲晶體上),經(jīng)衍射后各種波長(zhǎng)的X射線(xiàn)按不同的布拉格角彼此分開(kāi),因此如轉(zhuǎn)動(dòng)晶體,改變衍射角,同時(shí)以?xún)杀队诰w的轉(zhuǎn)速轉(zhuǎn)動(dòng)計(jì)數(shù)器,就可以依次測(cè)量出各種元素所產(chǎn)生的X射線(xiàn)波長(zhǎng)和強(qiáng)度,達(dá)到定性和定量分析的目的。當(dāng)某一X射線(xiàn)光子進(jìn)入計(jì)數(shù)管后,管內(nèi)氣體電離,并在電場(chǎng)作用下產(chǎn)生電脈沖信號(hào)。
該系統(tǒng)為電子探針?lè)治鎏峁┚哂凶銐蚋叩娜肷淠芰?,足夠大的束流和在樣品表面轟擊殿處束斑直徑近可能小的電子束,作為X射線(xiàn)的激發(fā)源。為此,一般也采用鎢絲熱發(fā)射電子槍和2-3個(gè)聚光鏡的結(jié)構(gòu)。 為了提高X射線(xiàn)的信號(hào)強(qiáng)度,電子探針必須采用較掃描電鏡更高的入射電子束流(在10-9-10-7A范圍),常用的加速電壓為10-30 KV,束斑直徑約為0.5μm。電子探針在鏡筒部分與掃描電鏡明顯不同之處是由光學(xué)顯微鏡。它的作用是選擇和確定分析點(diǎn)。其方法是,先利用能發(fā)出熒光的材料(如ZrO2)置于電子束轟擊下,這是就能觀(guān)察到電子束轟擊點(diǎn)的位置,通過(guò)樣品移動(dòng)裝置把它調(diào)到光學(xué)顯微鏡目鏡十字線(xiàn)交叉點(diǎn)上,這樣就能保證電子束正好轟擊在分析點(diǎn)上,同時(shí)也保證了分析點(diǎn)處于X射線(xiàn)分光譜儀的正確位置上。在電子探針上大多使用的光學(xué)顯微鏡是同軸反射式物鏡,其優(yōu)點(diǎn)是光學(xué)觀(guān)察和X射線(xiàn)分析可同時(shí)進(jìn)行。放大倍數(shù)為100-500倍。電子探針是運(yùn)用電子所形成的探測(cè)針(細(xì)電子束)作為X射線(xiàn)的激發(fā)源來(lái)進(jìn)行顯微X射線(xiàn)光譜分析的儀器。靜安區(qū)質(zhì)量探針維修價(jià)格
它的作用是選擇和確定分析點(diǎn)。嘉定區(qū)質(zhì)量探針五星服務(wù)
(3)X射線(xiàn)強(qiáng)度測(cè)量系統(tǒng)。特征X射線(xiàn),由B系統(tǒng)中的計(jì)數(shù)管接收,并轉(zhuǎn)換成電脈沖,通過(guò)脈沖高度分析儀、計(jì)數(shù)率計(jì)、定標(biāo)器、電子電位計(jì)將其強(qiáng)度測(cè)量出來(lái)。(4)光學(xué)顯微鏡目測(cè)系統(tǒng)。用以準(zhǔn)確選擇需要分析的區(qū)域,并作光學(xué)觀(guān)察。(5)背散射電子圖像系統(tǒng)。(6)吸收電子圖像系統(tǒng)。(7)特征X射線(xiàn)圖像系統(tǒng)。電子探針的技術(shù)**是利用X射線(xiàn)晶體光學(xué),主要應(yīng)用兩種方法:1)晶體衍射法(X射線(xiàn)光譜法)。利用晶體轉(zhuǎn)到一定角度,來(lái)衍射某種波長(zhǎng)的X射線(xiàn),通過(guò)讀出晶體不同的衍射角,求出X射線(xiàn)的波長(zhǎng),從而定出樣品所含的元素。嘉定區(qū)質(zhì)量探針五星服務(wù)
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