細(xì)菌的基因組大小約5×106bp,約含3000個(gè)基因。各種細(xì)菌之間絕大部分DNA是相同的,要獲得某細(xì)菌特異的核酸探針,通常要采取建立細(xì)菌基因組DNA文庫的辦法,即將細(xì)菌DNA切成小片段后分別克隆得到包含基因組的全信息的克隆庫。然后用多種其它菌種的DNA作探針來篩選,產(chǎn)生雜交信號(hào)的克隆被剔除,***剩下的不與任何其它細(xì)菌雜交的克隆則可能含有該細(xì)菌特異性DNA片段。將此重組質(zhì)粒標(biāo)記后作探針進(jìn)一步鑒定,亦可經(jīng)DNA序列分析鑒定其基因來源和功能。因此要得到一種特異性DNA探針,常常是比較繁瑣的。為此,一般也采用鎢絲熱發(fā)射電子槍和2-3個(gè)聚光鏡的結(jié)構(gòu)。松江區(qū)質(zhì)量探針現(xiàn)價(jià)
電子探針X射線顯微分析儀(簡稱電子探針)利用約1Pm的細(xì)焦電子束,在樣品表層微區(qū)內(nèi)激發(fā)元素的特征X射線,根據(jù)特征X射線的波長和強(qiáng)度,進(jìn)行微區(qū)化學(xué)成分定性或定量分析。電子探針的光學(xué)系統(tǒng)、真空系統(tǒng)等部分與掃描電鏡基本相同,通常也配有二次電子和背散射電子信號(hào)檢測器,同時(shí)兼有組織形貌和微區(qū)成分分析兩方面的功能。電子探針的構(gòu)成除了與掃描電鏡結(jié)構(gòu)相似的主機(jī)系統(tǒng)以外,還主要包括分光系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)等部分。電子探針主要由電子光學(xué)系統(tǒng)(鏡筒),X射線譜儀和信息記錄顯示系統(tǒng)組成。電子探針和掃描電鏡在電子光學(xué)系統(tǒng)的構(gòu)造基本相同,它們常常組合成單一的儀器。松江區(qū)質(zhì)量探針現(xiàn)價(jià)主要用來分析固體物質(zhì)表面的細(xì)小顆?;蛭⑿^(qū)域,小范圍直徑為1μm左右。
血凝素與生物素有非常高的親和性,當(dāng)血凝素標(biāo)記上過氧化物酶或堿性磷酸酶,經(jīng)雜交反應(yīng)**終形成探針-生物素-血凝素酶復(fù)合物(ABC法),酶催化底物顯色,觀察結(jié)果。ABC法底物顯色生成不溶物,以便觀測結(jié)果。酶標(biāo)記法復(fù)雜、重復(fù)性差,成本高,但便于運(yùn)輸、保存,靈敏度與放射物標(biāo)記法相當(dāng)。探針標(biāo)記方法①缺口平移標(biāo)記法。利用的是DNA聚合酶I能修復(fù)DNA鏈的功能。該法先由DNaseI在DNA雙鏈上隨機(jī)切出切口,然后DNA聚合酶I沿缺口水解5´端核苷酸,同時(shí)在3´端修復(fù)加入被標(biāo)記核苷酸,切口平行推移。缺口平移法快速、簡便、成本相對(duì)較低、比活性相對(duì)較高、標(biāo)記均勻,多用于大分子DNA標(biāo)記,(>1000bp比較好),但單鏈DNA、RNA不能用該法標(biāo)記。
進(jìn)行分子突變需要大量的探針拷貝,后者一般是通過分子克?。╩olecular cloning)獲得的??寺∈侵赣脽o性繁殖方法獲得同一個(gè)體、細(xì)胞或分子的大量復(fù)制品。當(dāng)制備基因組DNA探針前,應(yīng)先制備基因組文庫,即把基因組DNA打斷,或用限制性酶作不完全水解,得到許多大小不等的隨機(jī)片段,將這些片段體外重組到運(yùn)載體(噬菌體、質(zhì)粒等)中去,再將后者轉(zhuǎn)染適當(dāng)?shù)乃拗骷?xì)胞如大腸肝菌,這時(shí)在固體培養(yǎng)基上可以得到許多攜帶有不同DNA片段的克隆噬菌斑,通過原位雜交,從中可篩出含有目的基因片段的克隆,然后通過細(xì)胞擴(kuò)增,制備出大量的探針。分析對(duì)象是固體物質(zhì)表面細(xì)小顆?;蛭⑿^(qū)域,小范圍直徑為1μm。
DNA探針可以用來診斷寄生蟲病,現(xiàn)場調(diào)查及蟲種鑒定,可用于病毒性肝炎的診斷,遺傳性疾病的診斷,可用于檢測飲用水病毒含量。具體方法:用一個(gè)特定的DNA片段制成探針,與被測的病毒DNA雜交,從而把病毒檢測出來。與傳統(tǒng)方法相比具有快速、靈敏的特點(diǎn)。傳統(tǒng)的檢測一次,需幾天或幾個(gè)星期的時(shí)間,精確度不高,而用DNA探針只需一天。據(jù)報(bào)道,能從1t水中檢測出10個(gè)病毒來,精確度**提高。RNA探針是一類很有前途的核酸探針,由于RNA是單鏈分子,所以它與靶序列的雜交反應(yīng)效率極高。利用特征波長來確定元素的儀器叫做波長色散譜儀(波譜儀),利用特征能量的就稱為能量色散譜儀(能譜儀)。楊浦區(qū)特制探針生產(chǎn)廠家
探針卡是一種測試接口,主要對(duì)裸芯進(jìn)行測試,通過連接測試機(jī)和芯片,通過傳輸信號(hào)對(duì)芯片參數(shù)進(jìn)行測試.。松江區(qū)質(zhì)量探針現(xiàn)價(jià)
體外轉(zhuǎn)錄技術(shù)不斷完善,已相繼建立了單向和雙向體外轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)。該系統(tǒng)主要基于一類新型載體pSP和pGEM,這類載體在多克隆位點(diǎn)兩側(cè)分別帶有SP6啟動(dòng)子和T7啟動(dòng)子,在SP6RNA聚合酶或T7RNA聚合酶作用下可以進(jìn)行RNA轉(zhuǎn)錄,如果在多克隆位點(diǎn)接頭中插入了外源DNA片段,則可以此DNA兩條鏈中的一條為模板轉(zhuǎn)錄生成RNA。這種體外轉(zhuǎn)錄反應(yīng)效率很高,在1h內(nèi)可合成近10μg的RNA產(chǎn)生,只要在底物中加入適量的放射性或生物素標(biāo)記的NTP,則所合成的RNA可得到高效標(biāo)記。該方法能有效地控制探針的長度并可提高標(biāo)記物的利用率。松江區(qū)質(zhì)量探針現(xiàn)價(jià)
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