在不損耗試樣的情況下,電子探針通常能分析直徑和深度不小于1微米范圍內(nèi)、原子序數(shù)4以上的所有元素;但是對原子序數(shù)小于12的元素,其靈敏度較差。常規(guī)分析的典型檢測相對靈敏度為萬分之一,在有些情況下可達(dá)十萬分之一。檢測的***靈敏度因元素而異,一般為10-14~10-16克。用這種方法可以方便地進(jìn)行點、線、面上的元素分析,并獲得元素分布的圖象。對原子序數(shù)高于10、濃度高于10%的元素,定量分析的相對精度優(yōu)于±2%。電子探針儀是 X射線光譜學(xué)與電子光學(xué)技術(shù)相結(jié)合而產(chǎn)生的。1948年法國的R.卡斯坦制造了***臺電子探針儀。1958年法國首先制造出商品儀器。電子探針儀與掃描電子顯微鏡在結(jié)構(gòu)上有許多共同處。70年代以來生產(chǎn)的電子探針儀上一般都帶有掃描電子顯微鏡功能,有的還附加另一些附件,使之除作微區(qū)成分分析外,還能觀察和研究微觀形貌、晶體結(jié)構(gòu)等。除H、He、Li、Be等幾個較輕元素外,還有U元素以后的元素以外都可進(jìn)行定性和定量分析。青浦區(qū)挑選探針銷售廠家

2)X射線能譜分析法。無須分析晶體,而直接將探測器接收的訊號加以放大,進(jìn)行脈沖幅度分析,通過選擇不同的脈沖幅度來確定入射x射線的能量,從而區(qū)分不同的特征X射線。計算時應(yīng)用布拉格方程:nλ=2dsinθ。 [2]1、能進(jìn)行微區(qū)分析。可分析數(shù)個μm3內(nèi)元素的成分。2、能進(jìn)行現(xiàn)場分析。無需把分析對象從樣品中取出,可直接對大塊試樣中的微小區(qū)域進(jìn)行分析。把電子顯微鏡和電子探針結(jié)合,可把在顯微鏡下觀察到的顯微組織和元素成分聯(lián)系起來。3、分析范圍廣。Z>4其中,波譜:Be~U,能譜:Na~U。奉賢區(qū)標(biāo)準(zhǔn)探針按需定制電子探針是法國制成的,是在1949年用電子顯微鏡和X射線光譜儀組合而成。

在原核表達(dá)系統(tǒng)中外源基因不僅進(jìn)行正向轉(zhuǎn)錄,有時還存在反向轉(zhuǎn)錄(即生成反義RNA),這種現(xiàn)象往往是外源基因表達(dá)不高的重要原因。另外,在真核系統(tǒng),某些基因也存在反向轉(zhuǎn)錄,產(chǎn)生反義RNA,參與自身表達(dá)的調(diào)控。在這些情況下,要準(zhǔn)確測定正向和反向轉(zhuǎn)錄水平就不能用雙鏈DNA探針,而只能用RNA探針或單鏈DNA探針。探針是能與特異靶分子反應(yīng)并帶有供反應(yīng)后檢測的合適標(biāo)記物的分子。利用核苷酸堿基順序互補(bǔ)的原理,用特異的基因探針即識別特異堿基序列的有標(biāo)記的一段單鏈DNA(或RNA)分子,與被測定的靶序列互補(bǔ),以檢測被測靶序列的技術(shù)叫核酸探針技術(shù)。探針制備就是將目的基因進(jìn)行標(biāo)記。
基因探針,即核酸探針,是一段帶有檢測標(biāo)記,且順序已知的,與目的基因互補(bǔ)的核酸序列(DNA或RNA)。基因探針通過分子雜交與目的基因結(jié)合,產(chǎn)生雜交信號,能從浩瀚的基因組中把目的基因顯示出來。根據(jù)雜交原理,作為探針的核酸序列至少必須具備以下兩個條件:①應(yīng)是單鏈,若為雙鏈,必須先行變性處理。②應(yīng)帶有容易被檢測的標(biāo)記。它可以包括整個基因,也可以**是基因的一部分;可以是DNA本身,也可以是由之轉(zhuǎn)錄而來的RNA。DNA探針根據(jù)其來源有3種:一種來自基因組中有關(guān)的基因本身,稱為基因組探針(genomic probe);另一種是從相應(yīng)的基因轉(zhuǎn)錄獲得了mRNA,再通過逆轉(zhuǎn)錄得到的探針,稱為cDNA探針(cDNA probe)。與基因組探針不同的是,cDNA探針不含有內(nèi)含子序列。此外,還可在體外人工合成堿基數(shù)不多的與基因序列互補(bǔ)的DNA片段,稱為寡核苷酸探針。只要令探測器連續(xù)進(jìn)行2θ角的掃描,即可在整個元素范圍內(nèi)實現(xiàn)連續(xù)測量。

探針的標(biāo)記也可以采用隨機(jī)引物法,即向變性的探針溶液加入6個核苷酸的隨機(jī)DNA小片段,作為引物,當(dāng)后者與單鏈DNA互補(bǔ)結(jié)合后,按堿基互補(bǔ)原則不斷在其3’OH端添加同位素標(biāo)記的單核苷酸,這樣也可以獲得比放射性很高的DNA探針。DNA探針是以病原微生物DNA或RNA的特異性片段為模板,人工合成的帶有放射性或生物素標(biāo)記的單鏈DNA片段,可用來快速檢測病原體。DNA探針將一段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素或熒光染料等標(biāo)記后制成的探針??膳c固定在硝酸纖維素膜的DNA或RNA進(jìn)行互補(bǔ)結(jié)合,經(jīng)放射自顯影或其他檢測手段就可以判定膜上是否有同源的核酸分子存在。(1)電子光學(xué)系統(tǒng)。電子束直徑0.1~1μm,電子束穿透深度1~3μm。青浦區(qū)特制探針維修價格
近年來半導(dǎo)體制程技術(shù)突飛猛進(jìn),超前摩爾定律預(yù)估法則好幾年,現(xiàn)階段已向7奈米以下挺進(jìn)。青浦區(qū)挑選探針銷售廠家
特異性探針有三種形式——cDNA、RNA、寡核苷酸。cDNA和寡核苷酸是**常采用的探針。RNA探針用途很廣,也容易獲得,但其不穩(wěn)定性限制了其商業(yè)用途。cDNA探針的獲得是,將特定的基因片段裝載到質(zhì)粒或噬菌體中,經(jīng)過擴(kuò)增、酶切、純化等復(fù)雜的步驟,才能得到一定長度的cDNA探針。這一過程比較復(fù)雜,有相應(yīng)條件的實驗室才能做到。寡核苷酸探針是在已知基因序列的情況下,由核酸合成儀來完成,可廉價獲得大量的此類探針。質(zhì)量也相對來說更為穩(wěn)定。由于cDNA探針長度通常為數(shù)百至數(shù)千個堿基,所以有良好的信號放大作用,但其滲透性比較差。寡核苷酸探針一般為十?dāng)?shù)個至數(shù)十個堿基,滲透性強(qiáng),但信號放大作用則較差,合成的多相寡核苷酸探針,敏感性可以達(dá)到cDNA探針?biāo)?。青浦區(qū)挑選探針銷售廠家
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