DNA Marker VII:精細(xì)助力分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)在分子生物學(xué)研究中,DNA Marker VII是一種廣使用的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn),主要用于瓊脂糖凝膠電泳中分析DNA片段的大小。它由6條帶狀雙鏈DNA條帶組成,覆蓋300 bp到2500 bp的分子量范圍,具體條帶大小分別為300 bp、500 bp、1000 bp、1500 bp、2000 bp和2500 bp。DNA Marker VII具有明顯的實(shí)驗(yàn)優(yōu)勢(shì)。其中,1500 bp的條帶濃度為100 ng/5 μL,顯示為加亮帶,便于快速定位和半定量分析,而其他條帶濃度約為50 ng/5 μL。此外,該產(chǎn)品已預(yù)混1×loading buffer,可直接取2-5 μL進(jìn)行電泳,操作簡(jiǎn)便,電泳圖像清晰。在實(shí)驗(yàn)中,DNA Marker VII適用于多種瓊脂糖凝膠濃度,建議電泳條件為1.0%的凝膠濃度、5-7 cm的凝膠長(zhǎng)度、4-10 V/cm的電壓,電泳時(shí)間約為20-25分鐘。通過(guò)EB染色或Goldview等染料進(jìn)行染色后,可在紫外燈下清晰觀察條帶。DNA Marker VII的保存條件為-20℃,有效期可達(dá)一年,短期頻繁使用可置于4℃保存。它不僅適用于DNA片段大小的確定,還可用于DNA含量的粗略定量,但不適用于精確定量??傊?,DNA Marker VII憑借其清晰的條帶、便捷的操作和穩(wěn)定的性能,已成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中不可或缺的工具,為科研人員提供了可靠的分子量參考。重組蛋白表達(dá)技術(shù)可用于多種下游應(yīng)用,包括基因調(diào)控分析、蛋白結(jié)構(gòu)及功能分析、蛋白質(zhì)間相互作用分析等。遼寧人源膠原蛋白開(kāi)發(fā)技術(shù)服務(wù)研發(fā)

在生物科技日新月異的發(fā)展浪潮中,江畢赤酵母表達(dá)VLP(病毒樣顆粒)技術(shù)服務(wù)正逐漸嶄露頭角,為眾多科研和應(yīng)用領(lǐng)域帶來(lái)了新的契機(jī)與突破。江畢赤酵母作為一種的表達(dá)系統(tǒng),在VLP的生產(chǎn)中具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。它能夠?qū)?fù)雜的蛋白質(zhì)進(jìn)行正確的折疊和修飾,使得表達(dá)出的VLP更接近天然病毒的結(jié)構(gòu)和功能。與其他表達(dá)系統(tǒng)相比,江畢赤酵母具有生長(zhǎng)速度快、易于培養(yǎng)和大規(guī)模發(fā)酵的特點(diǎn),能夠高效地生產(chǎn)大量的VLP。這不僅降低了生產(chǎn)成本,還提高了生產(chǎn)效率,為VLP的廣泛應(yīng)用奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。河北微生物基因編輯技術(shù)服務(wù)研發(fā)Ultra-Long Master Mix (2×)(With Dye)適用于多種長(zhǎng)片段PCR應(yīng)用,包括但不限于基因組測(cè)序、基因克隆。

在實(shí)驗(yàn)室中使用Thioredoxin-NP-27腸激酶底物時(shí),應(yīng)遵循以下步驟:1.稀釋底物:首先,使用反應(yīng)緩沖液(ReactionBuffer)將Thioredoxin-NP-27稀釋至0.1mg/ml。2.準(zhǔn)備反應(yīng)體系:取數(shù)個(gè)離心管,每個(gè)管中加入40μL稀釋后的Thioredoxin-NP-27溶液。3.添加腸激酶:然后,根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),向每個(gè)離心管中加入不同量的腸激酶溶液,例如0μL、2μL、3μL等,以評(píng)估不同酶量對(duì)底物的切割效果。4.補(bǔ)充反應(yīng)緩沖液:根據(jù)加入的腸激酶溶液量,相應(yīng)減少反應(yīng)緩沖液的量,以保持總體積不變。5.進(jìn)行酶切反應(yīng):將離心管置于37℃±0.5℃水浴中,反應(yīng)16小時(shí)。6.終止反應(yīng):反應(yīng)結(jié)束后,向每個(gè)反應(yīng)管中加入50μL的2×SDS凝膠加樣緩沖液,以終止酶切反應(yīng)。7.電泳分析:取出各反應(yīng)液20μL,進(jìn)行SDS-PAGE凝膠電泳,以觀察酶切效果。8.計(jì)算腸激酶活性:根據(jù)GB/T41907-2022標(biāo)準(zhǔn),按照提供的公式計(jì)算腸激酶活性,單位為腸激酶活性單位每毫克蛋白或固含物(U/mg)。9.保存條件:Thioredoxin-NP-27應(yīng)在-30~-15℃保存,運(yùn)輸時(shí)溫度應(yīng)≤0℃。
TthDNAPolymerase的熱穩(wěn)定性TthDNAPolymerase具有出色的熱穩(wěn)定性,能在高溫環(huán)境下維持活性。在PCR反應(yīng)中,面對(duì)反復(fù)的高溫變性步驟,其結(jié)構(gòu)依然穩(wěn)固,酶活性不易受影響。例如在95℃左右的高溫下長(zhǎng)時(shí)間孵育,依然能夠有效地催化DNA鏈的合成,保證PCR擴(kuò)增的順利進(jìn)行,這使得它在需要高溫條件的核酸擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)好,為復(fù)雜基因組的研究和檢測(cè)提供了可靠的酶工具,提高了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。TthDNAPolymerase的逆轉(zhuǎn)錄活性該酶具備獨(dú)特的逆轉(zhuǎn)錄活性,除了DNA聚合功能外,還能以RNA為模板合成cDNA。在RT-PCR實(shí)驗(yàn)中,它可以一步完成逆轉(zhuǎn)錄和PCR擴(kuò)增過(guò)程,簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)步驟,減少了樣本損失和污染的風(fēng)險(xiǎn)。像在檢測(cè)病毒RNA時(shí),TthDNAPolymerase能夠精細(xì)地將病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA并進(jìn)行擴(kuò)增,提高了檢測(cè)的靈敏度和效率,為RNA相關(guān)的分子生物學(xué)研究和臨床診斷開(kāi)辟了便捷的途徑。膠原蛋白是各種組織的組成部分。此外,這些蛋白質(zhì)還充當(dāng)信號(hào)分子,在生長(zhǎng)和修復(fù)過(guò)程中控制細(xì)胞行為。

DNA聚合酶識(shí)別dNTPs的過(guò)程是一個(gè)精確的分子識(shí)別過(guò)程,它涉及以下幾個(gè)關(guān)鍵步驟:1.**模板識(shí)別**:DNA聚合酶首先識(shí)別DNA模板上的堿基序列。這一過(guò)程依賴于堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,即腺嘌呤(A)與胸腺嘧啶(T)配對(duì),鳥(niǎo)嘌呤(G)與胞嘧啶(C)配對(duì)。DNA聚合酶通過(guò)其活性位點(diǎn)旁邊的模板來(lái)確定需要添加的互補(bǔ)dNTP。2.**dNTP結(jié)合**:DNA聚合酶的手指區(qū)負(fù)責(zé)結(jié)合dNTPs。當(dāng)dNTP與模板上的堿基配對(duì)時(shí),DNA聚合酶的手掌區(qū),也就是活性區(qū)域,會(huì)結(jié)合一個(gè)或兩個(gè)二價(jià)金屬離子(通常是鎂離子),幫助dNTP定位并準(zhǔn)備進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)。3.**催化反應(yīng)**:DNA聚合酶通過(guò)其活性位點(diǎn)催化dNTP與引物3-OH端的連接,形成新的磷酸二酯鍵。在這個(gè)過(guò)程中,dNTP失去一個(gè)磷酸基團(tuán)(形成焦磷酸),這個(gè)焦磷酸分子水解,為DNA聚合酶繼續(xù)工作提供了能量。4.**校對(duì)功能**:某些DNA聚合酶(如DNA聚合酶I)具有校對(duì)功能,可以偵查、移除并改正錯(cuò)誤,從而生產(chǎn)出一條無(wú)誤的新DNA鏈。這種校對(duì)功能是通過(guò)識(shí)別并去除不匹配的dNTPs來(lái)實(shí)現(xiàn)的。DL1000 DNA Marker的條帶清晰、亮度均勻,即使在反復(fù)凍融后仍能保持良好的穩(wěn)定性。江蘇漢遜酵母表達(dá)HPV VLP技術(shù)服務(wù)開(kāi)發(fā)
其中,部分條帶(如1,000 bp或5,000 bp)會(huì)加亮顯示,便于快速定位和半定量分析。遼寧人源膠原蛋白開(kāi)發(fā)技術(shù)服務(wù)研發(fā)
GoldenView II吖啶橙核酸染料:高效、安全的核酸檢測(cè)選擇GoldenView II吖啶橙核酸染料是一種新型的花青類核酸染料,可有效替代傳統(tǒng)的溴化乙錠(EB),廣泛應(yīng)用于核酸的檢測(cè)和染色。它在瓊脂糖凝膠電泳中表現(xiàn)出色,與核酸結(jié)合后能產(chǎn)生強(qiáng)烈的熒光信號(hào),靈敏度比EB高出5-10倍。工作原理GoldenView II通過(guò)與核酸的特異性結(jié)合發(fā)出熒光。與雙鏈DNA結(jié)合時(shí),其熒光發(fā)射峰為530 nm,呈現(xiàn)綠色熒光;而與單鏈DNA或RNA結(jié)合時(shí),發(fā)射峰為640 nm,呈現(xiàn)紅色熒光。這種特性使其不僅能用于DNA的檢測(cè),還可用于RNA的染色。使用方法GoldenView II的使用方法與EB相似,但具有更高的靈敏度和安全性。在瓊脂糖凝膠電泳中,將染料加入凝膠溶液中,冷卻后倒膠并進(jìn)行電泳。電泳結(jié)束后,可通過(guò)紫外透射儀或凝膠成像系統(tǒng)觀察結(jié)果。優(yōu)勢(shì)與應(yīng)用GoldenView II的主要優(yōu)勢(shì)在于其高靈敏度和低毒性。與EB相比,它在紫外光下的熒光強(qiáng)度更高,背景更清晰。此外,它還可用于細(xì)胞內(nèi)DNA和RNA的染色,幫助研究細(xì)胞周期、凋亡和自噬等過(guò)程。GoldenView II廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn),如基因克隆、PCR產(chǎn)物分析和質(zhì)粒提取等。它不僅適用于常規(guī)的瓊脂糖凝膠電泳,還可用于熒光顯微鏡和流式細(xì)胞儀檢測(cè)。遼寧人源膠原蛋白開(kāi)發(fā)技術(shù)服務(wù)研發(fā)