斑馬魚免疫系統(tǒng)與人類高度相似，為抑炎功效研究提供了獨(dú)特模型。實(shí)驗(yàn)通過尾鰭切斷誘導(dǎo)局部炎癥，利用轉(zhuǎn)基因熒光標(biāo)記技術(shù)追蹤中性粒細(xì)胞遷移。例如，某含積雪草苷的乳液可使斑馬魚尾鰭傷口處中性粒細(xì)胞聚集量減少65%，且巨噬細(xì)胞清理率提升40%。該方法基于LPS誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激反應(yīng)，通過檢測活性氧（ROS）水平與炎癥因子（如IL-6、TNF-α）表達(dá)量實(shí)現(xiàn)量化評估。相較于小鼠耳腫脹實(shí)驗(yàn)，斑馬魚模型可減少90%的動物使用量，且結(jié)果與人體臨床數(shù)據(jù)相關(guān)性達(dá)0.83。目前，水中銀、廣州魯比生物等機(jī)構(gòu)已開發(fā)斑馬魚抑炎功效評價(jià)試劑盒，并應(yīng)用于薇諾娜、百雀羚等品牌的產(chǎn)品開發(fā)。實(shí)驗(yàn)室設(shè)置單獨(dú)潔面區(qū)，確保受試者皮膚預(yù)處理標(biāo)準(zhǔn)化，提升測試結(jié)果可靠性?；瘖y品新原料申報(bào)周期

目前，化妝品原料過敏性檢測主要依賴動物實(shí)驗(yàn)替代方法、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和人體斑貼試驗(yàn)。動物實(shí)驗(yàn)替代方法：如局部淋巴結(jié)試驗(yàn)（LLNA），通過檢測小鼠耳部淋巴結(jié)中增殖的淋巴細(xì)胞數(shù)量評估致敏性，靈敏度達(dá)80%以上，且減少動物痛苦。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)：基于角質(zhì)形成細(xì)胞或樹突狀細(xì)胞的體外模型，如KeratinoSens?和h-CLAT試驗(yàn)，通過檢測細(xì)胞因子分泌或表面標(biāo)志物變化預(yù)測致敏潛力。人體斑貼試驗(yàn)：將原料封閉貼敷于受試者背部皮膚，48小時(shí)后觀察反應(yīng)，是驗(yàn)證原料安全性的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但耗時(shí)長、成本高。此外，新興的組學(xué)技術(shù)（如轉(zhuǎn)錄組學(xué)、代謝組學(xué)）正逐步應(yīng)用于致敏機(jī)制研究，為精細(xì)檢測提供新思路。化妝品功效評價(jià)備案機(jī)構(gòu)受試者管理室采用信息化系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)志愿者招募、分組及隨訪的全流程追蹤。

盡管用于化妝品評價(jià)的創(chuàng)新模型和技術(shù)在不斷發(fā)展，但無論是斑馬魚模型、體外細(xì)胞模型還是皮膚器官芯片等均不能完全模擬體內(nèi)皮膚的真實(shí)結(jié)構(gòu)與功能，這使得離體皮膚評價(jià)模型逐漸進(jìn)入人們的視野。離體皮膚也被稱為皮膚外植體，它是由人體來源的皮膚組織經(jīng)體外培養(yǎng)而獲得的模型[26]。離體皮膚通過適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)方式，可在體外維持一定的組織活力，目前，已被廣泛應(yīng)用于化妝品功效測評、傷口愈合、皮膚相關(guān)疾病的研究中。離體皮膚是接近健康和患病皮膚生理機(jī)能的模型，包含完整的皮膚細(xì)胞類群如角質(zhì)形成細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、黑素細(xì)胞、朗格漢斯細(xì)胞;含有膠原蛋白、彈性蛋白、糖胺聚糖等細(xì)胞外基質(zhì);包含皮膚附屬物如汗腺等叨。本文將在下面章節(jié)重點(diǎn)概述離體皮膚模型及其在化妝品功效評價(jià)中的應(yīng)用。

隨著消費(fèi)者對健康和環(huán)保意識的提升，天然成分在化妝品研發(fā)中的應(yīng)用越來越寬泛。研發(fā)人員致力于從大自然中發(fā)掘具有護(hù)膚、美容功效的珍貴成分，如植物提取物、海洋精華和天然油脂等。這些成分不僅能夠有效改善肌膚狀態(tài)，如保濕、抗氧化和舒緩肌膚，還能減少化學(xué)合成成分對肌膚可能造成的負(fù)擔(dān)。在提取和加工這些天然成分時(shí)，研發(fā)人員需要采用先進(jìn)的科技手段，以確保其活性成分得以完整保留，同時(shí)避免對自然環(huán)境造成破壞。天然成分的應(yīng)用，不僅提升了化妝品的品質(zhì)，也滿足了現(xiàn)代消費(fèi)者對綠色、健康生活的追求?？拱櫨o致評估：通過皮膚彈性儀與圖像分析，量化皺紋深度減少百分比。

斑馬魚尾部脫水皺縮模型是評估化妝品保濕性能的關(guān)鍵工具。其皮膚真皮層含水通道蛋白AQP3，與人類透明質(zhì)酸合成酶HAS3協(xié)同調(diào)控水分平衡。實(shí)驗(yàn)中，將斑馬魚胚胎置于高滲氯化鈉溶液中，尾部因脫水發(fā)生皺縮，通過顯微鏡測量尾部面積變化并檢測aqp3、has3基因表達(dá)量。例如，某糙米發(fā)酵濾液可使斑馬魚尾部面積縮小抑制率達(dá)65%，同時(shí)aqp3基因表達(dá)量提升2.3倍，證實(shí)其強(qiáng)的效保濕能力。該模型已被江蘇省特殊化妝品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心等機(jī)構(gòu)納入標(biāo)準(zhǔn)檢測流程，成為保濕功效宣稱的重要依據(jù)。防曬指數(shù)測定：依據(jù)ISO 24444標(biāo)準(zhǔn)，檢測SPF/PA值并標(biāo)注于證書主要位置?；瘖y品體外實(shí)驗(yàn)

敏感肌適用：完成乳酸刺痛試驗(yàn)與紅斑指數(shù)測試，確認(rèn)低刺激配方安全性?；瘖y品新原料申報(bào)周期

不同于新興的3D重組皮膚模型、皮膚類organ和器官芯片模型，離體皮膚雖然擁有較為久遠(yuǎn)的發(fā)展歷史，但由于其具有倫理限制、獲取困難、個(gè)體差異等特殊的局限性，在化妝品領(lǐng)域的應(yīng)用并不寬泛。與傳統(tǒng)的細(xì)胞模型相比，離體皮膚不僅可以在分子細(xì)胞水平實(shí)現(xiàn)對待測物的評估，更能在組織水平評估待測物的功效，具有良好的可視化和宣傳效果。已有大量的研究表明，離體皮膚是研究經(jīng)皮給藥、化妝品及原材料功效、藥品和化妝品安全性、刺激性和毒性的有效替代模型，也逐漸被國內(nèi)外藥品和化妝品的原料商、出品方、監(jiān)管機(jī)構(gòu)和消費(fèi)者所認(rèn)可。離體皮膚在化妝品領(lǐng)域的應(yīng)用或?qū)浹a(bǔ)化妝品安全性和功效評價(jià)體系的缺口。然而，目前國內(nèi)外仍缺乏離體皮膚用于化妝品功效評價(jià)的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)和監(jiān)督管理規(guī)范，未來可通過起草離體皮膚評價(jià)方法的技術(shù)指南、制定離體皮膚用于化妝品功效評價(jià)的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范、完善化妝品安全監(jiān)管的法律法規(guī)文件，進(jìn)一步提高離體皮膚模型在行業(yè)內(nèi)的認(rèn)可度、擴(kuò)大離體皮膚模型在化妝品領(lǐng)域的應(yīng)用范圍?；瘖y品新原料申報(bào)周期