ELISA技術(shù)歷經(jīng)數(shù)十年發(fā)展仍被廣泛應(yīng)用,歸功于其***的優(yōu)點(diǎn):1.高靈敏度:通過酶促反應(yīng)放大信號(hào),可檢測(cè)皮克(pg/mL)甚至飛克(fg/mL)級(jí)別的目標(biāo)分子,遠(yuǎn)高于許多傳統(tǒng)生化方法。2.高特異性:基于抗原-抗體高度特異的結(jié)合反應(yīng),尤其是使用單克隆抗體的夾心法,能有效區(qū)分結(jié)構(gòu)相似的分子。3.高通量:96孔板(或更多孔)的設(shè)計(jì)允許同時(shí)處理大量樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,結(jié)合自動(dòng)化設(shè)備(移液工作站、洗板機(jī)、酶標(biāo)儀),非常適合大規(guī)模篩查和批量檢測(cè)。4.相對(duì)簡(jiǎn)便快速:試劑盒化使得操作流程標(biāo)準(zhǔn)化,無需復(fù)雜設(shè)備(基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室配備移液器、孵育箱、洗板設(shè)備、酶標(biāo)儀即可),實(shí)驗(yàn)時(shí)間通常在幾小時(shí)內(nèi)完成。5.可定量:通過標(biāo)準(zhǔn)曲線可實(shí)現(xiàn)目標(biāo)物的精確定量分析。6.應(yīng)用范圍極其***:可檢測(cè)幾乎所有類型的生物分子(蛋白質(zhì)、多肽、***、抗體、病原體抗原、小分子半抗原等),樣本來源多樣(血清、血漿、細(xì)胞上清、組織裂解液、尿液等)。7.成本效益相對(duì)較高:與質(zhì)譜、測(cè)序等更高級(jí)技術(shù)相比,儀器和試劑成本較低,單個(gè)樣本檢測(cè)成本可控。8.結(jié)果可視化/客觀化:顯色反應(yīng)肉眼可見(定性),吸光度讀數(shù)提供客觀數(shù)據(jù)。多克隆抗體包被的試劑盒檢測(cè)范圍更廣。上海豬ELISA試劑盒售價(jià)

競(jìng)爭(zhēng)法(CompetitiveELISA)通常用于檢測(cè)小分子抗原(半抗原),如***、藥物、***等,這些小分子通常只有一個(gè)抗原表位,無法使用夾心法。其原理基于待測(cè)抗原(樣品中)與標(biāo)記抗原(通常酶標(biāo))競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合有限的抗體結(jié)合位點(diǎn)。有兩種常見形式:·形式A(包被抗原):1.包被已知抗原(非目標(biāo)小分子,常為與目標(biāo)分子結(jié)構(gòu)相似的蛋白偶聯(lián)物)。2.封閉。3.同時(shí)加入:待測(cè)樣品(含未知量目標(biāo)小分子)+固定量的酶標(biāo)記特異性抗體。樣品中的游離小分子與包被抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合酶標(biāo)抗體。4.洗滌:洗去未結(jié)合的酶標(biāo)抗體(包括與游離小分子結(jié)合的)。5.加底物顯色。黑龍江科研ELISA試劑盒怎么用其組成部分包括包被板、酶標(biāo)抗體和顯色底物。

相較于傳統(tǒng)的儀器分析方法(如高效液相色譜法 HPLC、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法 GC-MS),ELISA 技術(shù)具有***的優(yōu)勢(shì)。首先,其前處理流程簡(jiǎn)單,大多數(shù)樣本*需均質(zhì)、提取、離心等基本操作即可上機(jī)檢測(cè),省去了復(fù)雜的純化步驟,單個(gè)樣本的檢測(cè)時(shí)間可縮短至 1 小時(shí)內(nèi),大幅提高了檢測(cè)效率。其次,ELISA 試劑盒的成本較低,無需依賴昂貴的儀器設(shè)備,*需酶標(biāo)儀即可完成檢測(cè),特別適合基層檢測(cè)機(jī)構(gòu)、市場(chǎng)監(jiān)管部門及企業(yè)自檢使用。此外,ELISA 技術(shù)可同時(shí)處理 96 孔板樣本,適用于大規(guī)模篩查,在突發(fā)食品安全事件中能夠快速鎖定問題批次,為監(jiān)管部門提供及時(shí)的數(shù)據(jù)支持。
食品安全關(guān)乎公眾健康。ELISA憑借其快速、靈敏、高通量、相對(duì)低成本的優(yōu)勢(shì),成為食品中危害因子(病原微生物、***、農(nóng)獸藥殘留、非法添加物、過敏原)檢測(cè)的重要工具?!z測(cè)靶標(biāo)與模式:o食源***原菌及其***:沙門氏菌、大腸桿菌O157:H7、李斯特菌、金黃色葡萄球菌腸***等。常用夾心法檢測(cè)菌體抗原或***蛋白。o******(Mycotoxins):黃曲霉***B1(AFB1)、赭曲霉***A(OTA)、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(DON嘔吐***)、玉米赤霉烯酮(ZEN)、伏馬菌素(FUM)等。多為小分子,采用競(jìng)爭(zhēng)法ELISA。o農(nóng)藥殘留(PesticideResidues):有機(jī)磷、氨基甲酸酯、擬除蟲菊酯類等殺蟲劑;三嗪類、磺酰脲類除草劑等。競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)。o獸藥殘留(VeterinaryDrugResidues):***(如β-內(nèi)酰胺類、磺胺類、四環(huán)素類、氯霉素)、合成***(如己烯雌酚DES)、β-受體激動(dòng)劑(如克倫特羅,“瘦肉精”)等。競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)。o過敏原(Allergens):檢測(cè)食品中殘留的花生、牛奶、雞蛋、麩質(zhì)、堅(jiān)果、芝麻、甲殼類等過敏原蛋白,用于生產(chǎn)交叉污染監(jiān)控和成品檢測(cè)。夾心法。o非法添加物:如三聚氰胺(奶制品)、蘇丹紅(辣椒制品)等。競(jìng)爭(zhēng)法或夾心法(針對(duì)蛋白摻假)。某些病毒抗原檢測(cè)需在BSL-2實(shí)驗(yàn)室操作。

環(huán)境污染物對(duì)生態(tài)系統(tǒng)和人類健康構(gòu)成威脅。ELISA作為一種快速靈敏的現(xiàn)場(chǎng)篩查工具,在環(huán)境監(jiān)測(cè)領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用:·檢測(cè)對(duì)象:o農(nóng)藥殘留:檢測(cè)土壤、水體(地表水、地下水)、農(nóng)產(chǎn)品中殘留的有機(jī)磷、有機(jī)氯、三嗪類、擬除蟲菊酯等農(nóng)藥。常用競(jìng)爭(zhēng)法ELISA試劑盒。o獸藥殘留:監(jiān)測(cè)養(yǎng)殖場(chǎng)廢水、地表水中***(如磺胺類、四環(huán)素類)和***殘留。o生物***:檢測(cè)水體(尤其是藻華期間)中的微囊藻***(Microcystins)、石房蛤***(Saxitoxin)等藻***;檢測(cè)糧食、飼料中的******污染。o重金屬:雖然ELISA不直接檢測(cè)金屬離子,但可開發(fā)針對(duì)重金屬離子(如汞Hg2?、鎘Cd2?)螯合復(fù)合物的競(jìng)爭(zhēng)法ELISA,或檢測(cè)重金屬誘導(dǎo)產(chǎn)生的特異性蛋白(如金屬硫蛋白)。o環(huán)境***(內(nèi)分泌干擾物):檢測(cè)雙酚A(BPA)、烷基酚、鄰苯二甲酸酯類等具有雌***活性的化合物。競(jìng)爭(zhēng)法。o病原微生物指示物:檢測(cè)水體中大腸桿菌等糞便污染指示菌的特異性抗原。·應(yīng)用場(chǎng)景:污染源調(diào)查、環(huán)境質(zhì)量例行監(jiān)測(cè)、突發(fā)污染事件應(yīng)急響應(yīng)、污水處理廠出水監(jiān)測(cè)、飲用水安全篩查??蒲屑?jí)ELISA試劑盒通常提供詳細(xì)的技術(shù)支持。廣西小鼠ELISA試劑盒銷售價(jià)格
部分試劑盒提供即用型溶液,節(jié)省配制時(shí)間。上海豬ELISA試劑盒售價(jià)
ELISA的結(jié)果可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮驮噭┖性O(shè)計(jì)進(jìn)行不同方式的判讀:·定量分析(Quantitative):這是最常見的應(yīng)用。通過精確的標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算出樣品中目標(biāo)物的***濃度(如ng/mL,pg/mL,IU/mL)。要求標(biāo)準(zhǔn)品濃度準(zhǔn)確,曲線擬合良好(R2>0.99),樣品OD值落在曲線范圍內(nèi)(比較好在中間線性好的部分)。適用于需要精確數(shù)值的研究和診斷?!ぐ攵糠治觯⊿emi-quantitative):當(dāng)無法獲得或不需要***濃度值時(shí)使用。通常將樣品的OD值與標(biāo)準(zhǔn)品(或一個(gè)已知的強(qiáng)陽(yáng)性對(duì)照)的OD值進(jìn)行比較,報(bào)告為“相當(dāng)于XXU/mL”或“高/中/低”?;蛘咴O(shè)定一個(gè)Cut-off值(臨界值),高于此值判為陽(yáng)性,低于判為陰性。常用于大批量篩查或監(jiān)測(cè)相對(duì)變化(如***前后抗體滴度變化)?!ざㄐ苑治觯≦ualitative):主要用于判斷樣品中目標(biāo)物是否存在(陽(yáng)性或陰性)。同樣需要設(shè)定一個(gè)Cut-off值。Cut-off值通?;陉幮詫?duì)照的平均OD值加上2倍或3倍標(biāo)準(zhǔn)差(陰性均值+2SD/3SD),或基于ROC曲線分析確定。定性檢測(cè)在傳染病篩查(如HIV、HCV抗體)、妊娠檢測(cè)等中應(yīng)用***。無論哪種判讀方式,設(shè)置合理的對(duì)照(空白、陰性、陽(yáng)性、質(zhì)控)和嚴(yán)格遵守操作規(guī)程是結(jié)果可靠性的基石。上海豬ELISA試劑盒售價(jià)