***是內(nèi)分泌腺或細(xì)胞分泌的、通過血液循環(huán)作用于靶***的化學(xué)信使。準(zhǔn)確測(cè)定***水平對(duì)于內(nèi)分泌疾病的診斷、***監(jiān)測(cè)和生理研究至關(guān)重要。ELISA是臨床和科研中檢測(cè)多種***的主流技術(shù)。·檢測(cè)對(duì)象:血清、血漿、尿液(如24h尿皮質(zhì)醇)中的肽類/蛋白類***和部分小分子類固醇***(需競(jìng)爭(zhēng)法)。o肽類/蛋白類***:胰島素、C肽、胰***素、生長(zhǎng)***(GH)、促腎上腺皮質(zhì)***(ACTH)、促甲狀腺***(TSH)、黃體生成素(LH)、卵泡刺***(FSH)、泌乳素(PRL)、甲狀旁腺***(PTH)、降鈣素等。通常使用夾心法。o類固醇***:皮質(zhì)醇、睪酮、雌二醇(E2)、孕酮(P)、脫氫表雄酮(DHEA-S)、25-羥基維生素D等。由于是小分子,主要采用競(jìng)爭(zhēng)法ELISA。也可檢測(cè)尿液中的***代謝物(如雌三醇)。多克隆抗體包被的試劑盒檢測(cè)范圍更廣。山西魚ELISA試劑盒怎么用

隨著移動(dòng)醫(yī)療技術(shù)的進(jìn)步,智能手機(jī)與微型ELISA裝置的結(jié)合為家庭自測(cè)提供了新思路。例如,用戶可通過手機(jī)攝像頭拍攝試紙條的顯色結(jié)果,配合**APP進(jìn)行圖像分析(如RGB值測(cè)量),實(shí)現(xiàn)半定量檢測(cè)。部分研究團(tuán)隊(duì)還開發(fā)了便攜式微流控ELISA芯片,*需一滴血或唾液即可完成檢測(cè),并通過藍(lán)牙將數(shù)據(jù)傳輸至手機(jī),便于遠(yuǎn)程醫(yī)療咨詢。這類技術(shù)特別適用于慢性病監(jiān)測(cè)(如糖尿病、心血管標(biāo)志物檢測(cè))和傳染病篩查(如流感、HIV自檢),有望降低醫(yī)療成本并提高疾病管理的便捷性。甘肅國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒銷售價(jià)格96孔板設(shè)計(jì)可實(shí)現(xiàn)高通量樣本并行檢測(cè)。

為了確保ELISA結(jié)果的準(zhǔn)確性、精密度和可靠性,貫穿實(shí)驗(yàn)全程的質(zhì)量控制必不可少:·內(nèi)部QC(實(shí)驗(yàn)內(nèi)):o空白孔(Blank):*含底物和終止液,用于儀器調(diào)零,扣除微孔板和試劑的背景吸光度。o陰性對(duì)照(NegativeControl,NC):通常是不含目標(biāo)分析物的基質(zhì)(如緩沖液、陰性血清)。用于評(píng)估背景信號(hào)和非特異性結(jié)合水平。是設(shè)定Cut-off值的基礎(chǔ)。o陽(yáng)性對(duì)照(PositiveControl,PC):含有已知量目標(biāo)分析物的樣品。用于確認(rèn)試劑盒有效性和整個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)工作正常。其信號(hào)應(yīng)明顯高于陰性對(duì)照,且濃度應(yīng)在預(yù)期范圍內(nèi)。o標(biāo)準(zhǔn)曲線:是定量的**。要求點(diǎn)分布良好,擬合曲線R2值高(通常>0.99),斜率、ED50等參數(shù)在合理范圍。標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)做復(fù)孔。o質(zhì)控品(QualityControls,QCs):**于標(biāo)準(zhǔn)品的、濃度已知(通常為低、中、高值)的樣品。其測(cè)定值必須在預(yù)設(shè)的可接受范圍內(nèi)(如均值±2SD或廠家聲明范圍)。QCs是判斷整板實(shí)驗(yàn)是否可接受的**重要指標(biāo)。o復(fù)孔(Replicates):樣品和關(guān)鍵對(duì)照(如NC,PC,QC)應(yīng)至少做雙孔。計(jì)算平均值和變異系數(shù)(CV%),CV%應(yīng)小于一定值(如<15-20%),表明精密度良好。
·非特異性結(jié)合:基質(zhì)中的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、DNA等非特異性吸附到固相或抗體上,增加背景或阻斷特異性結(jié)合?!そY(jié)合蛋白的競(jìng)爭(zhēng):目標(biāo)物(如***)可能與基質(zhì)中的結(jié)合蛋白(如白蛋白、球蛋白)結(jié)合,減少其與檢測(cè)抗體的有效結(jié)合。·酶抑制劑或***劑:基質(zhì)中存在抑制或***報(bào)告酶(HRP/ALP)活性的物質(zhì)(如某些抗體、膽紅素、抗壞血酸、EDTA)。·異嗜性抗體(HeterophilicAntibodies):人血清中存在的能與多種動(dòng)物(如鼠、羊、兔)IgGFc段低親和力結(jié)合的抗體,能在沒有目標(biāo)抗原的情況下橋接捕獲抗體(鼠源)和酶標(biāo)檢測(cè)抗體(如羊抗鼠),導(dǎo)致假陽(yáng)性。類風(fēng)濕因子(RF,抗人IgGFc的自身抗體)也可能干擾?!じ咧Y、溶血:影響光學(xué)檢測(cè)。識(shí)別基質(zhì)效應(yīng):通過回收率實(shí)驗(yàn)(RecoveryTest)和線性稀釋實(shí)驗(yàn)(LinearityofDilution)來評(píng)估。心肌肌鈣蛋白ELISA試劑盒用于急性心梗診斷。

ELISA貫穿于藥物研發(fā)(尤其是生物藥)的多個(gè)階段:·靶點(diǎn)驗(yàn)證:檢測(cè)潛在藥物靶點(diǎn)(如細(xì)胞表面受體、信號(hào)蛋白)在疾病組織中的表達(dá)水平?!は葘?dǎo)化合物篩選:基于ELISA的檢測(cè)方法可用于高通量篩選(HTS)能調(diào)節(jié)特定靶點(diǎn)活性(如抑制酶活性、阻斷蛋白-蛋白相互作用)的小分子或生物分子。·生物***抗體、重組蛋白、疫苗)分析:o表達(dá)量測(cè)定:在細(xì)胞培養(yǎng)過程中監(jiān)測(cè)目標(biāo)蛋白(如單抗)的產(chǎn)量(夾心法)。o結(jié)合活性(Potency):檢測(cè)藥物與其靶抗原的結(jié)合親和力和特異性(如使用包被抗原檢測(cè)樣品中藥物濃度及活性)。o宿主細(xì)胞蛋白(HCP)殘留檢測(cè):利用抗宿主細(xì)胞總蛋白的多克隆抗體,通過夾心法ELISA定量測(cè)定生物制品生產(chǎn)過程中殘留的宿主細(xì)胞蛋白雜質(zhì),是放行檢測(cè)的關(guān)鍵指標(biāo)。需要覆蓋***的HCP種類。oProteinA殘留檢測(cè):純化單抗過程中使用的ProteinA親和層析介質(zhì)可能殘留,需用ELISA檢測(cè)其殘留量。o抗藥抗體(Anti-DrugAntibody,ADA)檢測(cè):評(píng)估患者在接受生物藥***后是否產(chǎn)生針對(duì)該藥物的免疫反應(yīng)(中和抗體或非中和抗體)。試劑盒運(yùn)輸過程中需避免高溫和劇烈震蕩。魚ELISA試劑盒大概多少錢
加入終止液后應(yīng)在規(guī)定時(shí)間內(nèi)完成讀數(shù)。山西魚ELISA試劑盒怎么用
自身免疫病的特征是機(jī)體免疫系統(tǒng)錯(cuò)誤地攻擊自身組織。檢測(cè)血清中的自身抗體是診斷、分型、評(píng)估疾病活動(dòng)度和預(yù)后的重要手段。ELISA因其高通量和定量能力,成為檢測(cè)自身抗體的優(yōu)先方法之一?!こR姍z測(cè)靶點(diǎn):o抗核抗體(ANA):篩查系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)等結(jié)締組織病。ELISA可檢測(cè)針對(duì)特定核抗原(如dsDNA,Sm,RNP,SSA/Ro,SSB/La,Scl-70,Jo-1)的特異性抗體。o類風(fēng)濕因子(RF):檢測(cè)針對(duì)自身IgGFc段的抗體,與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)相關(guān)(但也見于其他疾病和健康老人)。o抗環(huán)瓜氨酸肽抗體(Anti-CCP):對(duì)RA診斷特異性高。o抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(ANCA):如c-ANCA(抗PR3,韋格納肉芽腫)、p-ANCA(抗MPO,顯微鏡下多血管炎)。o抗磷脂抗體(aPL):如抗心磷脂抗體(aCL)、抗β2糖蛋白I抗體(anti-β2GPI)、狼瘡抗凝物(LA),與抗磷脂綜合征(APS)相關(guān)。o***特異性抗體:如抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPOAb)、抗甲狀腺球蛋白抗體(TgAb)(橋本甲狀腺炎);抗谷氨酸脫羧酶抗體(GADAb)、抗胰島細(xì)胞抗體(ICA)(1型糖尿?。豢菇M織谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶抗體(tTG-IgA)(乳糜瀉)。山西魚ELISA試劑盒怎么用