然后再入固定液,但要注意防止組織損傷。要熟悉采集部位。要能準確的按解剖部位采集,如胰腺,一般取胰島較多的胰腺尾部;肺應取有細支氣管及帶有軟骨片的小支氣管部。如果實驗需進行多組織樣本的采集,采集順序應按照:消化,神經系統(tǒng),皮膚,肌肉等的順序進行。選好組織塊的切面。熟悉某些組織成分安排,然后決定其切面的走向;如一長管狀以橫切面較好。切除不需要的部分。特別是組織周圍的脂肪等,應盡可能掉,否則給固定、脫水、浸蠟、切片等帶來一些不必要的問題。組織樣品的固定(1)固定的方法:①小塊組織固定法:從動物取下的小塊組織,立即置入液態(tài)固定劑(這是應用經常的方法)。②注射/灌注固定法:某些組織塊由于體積過大或固定液極難滲入內部或需要對整個臟器或整個動物進行固定,這時宜采用注射固定法,將固定液注入血管,經血管分支到達整個組織和全身,從而得到充分的固定。另,空腔組織比如肺,肺內含有空氣,固定液難以滲入,建議先做肺灌注,使得肺充盈滿固定液以后再進行保存,如果空腔中氣體沒有有效排出,后續(xù)可能影響固定效果(沒有灌注的肺組織會浮在液體表面不利于固定,切片以后也會看到很多的空泡)。③蒸汽固定法:比較細小而薄的標本。裸鼠皮下成瘤:前肢近腋后皮下注射細胞懸液; 裸鼠原位瘤:胰腺成瘤;尾靜脈注射成瘤。西藏裸鼠動物模型服務

脂多糖致膿毒血癥肝損傷小鼠模型【方法】1、小鼠稱重,按體重計算藥物用量。2、脂多糖(LPS)藥物配制,生理鹽水溶解,根據(jù)小鼠體重配制終濃度為10mg/kg,200ul/只腹腔注射使用。3、抓取小鼠,捏緊小鼠頸背部皮膚,小拇指無名指疊加固定小鼠左下肢充分暴露小鼠腹部。4、小鼠的頭部向下,這樣腹腔中的就會自然倒向胸部,防止注射器刺入時損傷腸道。進針的動作要輕乘,防止刺傷腹部。5、注射器吸取準備好的藥物,腹腔左下部與身體呈45度角左右斜角進針注射LPS,注射完藥物后,輕微旋轉針頭退針,防止漏液。6、造模18h后處死小鼠解剖取組織進行組織病理學檢查。【檢測】肝組織有無:1、肝水腫;2、肝出血;3、炎性細胞浸潤;4、肝組織腫大等病理改變。再觀察肝損傷程度,各按程度積分為:0分為無該項病理改變;1分為病理變化輕且很局限;2分為病理變化中等且局限;3分為病變中等但或局部很;4分為非常的理改變。求出各動物的各項病理改變的總和,作為肝損傷程度積分。上海小鼠動物模型手術長期攝入酒精致慢性酒精性肝病,建立酒精肝大鼠模型。

四氯化碳誘導急性肝損傷大鼠模型【方法】1、將大鼠隨機分配至2組中,每組5只,正常喂食喂水7d后進行試驗;2、大鼠體重為200g±10g,按組別給予藥物:生理鹽水組每只腹腔注射1ml生理鹽水、模型組每只按5ml/kg背部皮下注射四氯化碳3、各組藥物注射24h后取材進行相關檢測(注:注射前按比例混合四氯化碳:橄欖油=1:)【評定】給予四氯化碳后TP含量下降,ALT和AST含量上升【檢測】生理鹽水組肝索結構清晰,血管內無淤血,血管周圍無炎癥病灶,肝小葉結構清晰;給予四氯化碳后肝索排列紊亂,結構不清,存在大量壞死區(qū)域且肝索結構消失,有大小不一的空泡結構,多數(shù)血管內有淤血并伴有粉染蛋白樣物質,血管周圍有炎癥反應灶,少量紅細胞滲出;西維來司鈉介入后肝索排列不清晰,存在部分壞死區(qū)域且肝索結構消失,有大小不一的空泡結構,少數(shù)血管內有淤血并伴有粉染蛋白樣物質,血管周圍有炎癥反應灶,極少量紅細胞滲出。
靜置25分鐘后把酒精倒干,用吸水紙吸出多余的酒精,然后配壓縮膠,同樣的操作,關鍵是梳子要插得快,要小心梳子下產生氣泡,然后靜置30分鐘。如果是當天跑膠,我會等上層膠凝2個小時再用,但要注意防干燥縮水,可以在一個小時的時候沿著梳子上緣加點電泳液。所以我一般提前一晚制膠,泡于純水或者電泳液里置于4度冰箱暫存。三、蛋白電泳1、上樣前準備把膠組裝到電泳芯上,注意密閉性(否則漏液),如果內槽漏液就不是勻強電場了,條帶可能就不是一條直線。然后內槽倒?jié)M電泳液,拔梳子,這一步要小心,梳子要兩邊一起緩緩往上拔出,然后觀察泳道內有無脫落的膠粒或者膠絲,有的話用1毫升注射器吸出。然后從冰箱取出蛋白樣品,解凍。準備振蕩器。2、上樣和電泳注意,上樣后蛋白會開始慢慢在膠中彌散,所以上樣越快越好。我習慣先上蛋白Marker,再上蛋白樣品,蛋白上樣前確保樣品完全解凍和充分振蕩(推薦使用振蕩器振蕩),吸的時候沒有拉絲即可,建議上樣分鐘把樣品從冰上取出來,不然樣品中SDS可能會結晶析出,從而影響電泳效果。上層膠80V25分鐘,下層膠120V65分鐘。四、轉膜1、轉膜前準備我會在電泳結束0分鐘準備,把轉膜液配好置于4度冰箱預冷,然后裁膜,準備轉膜裝置。通過阿霉素(Adriamycin,ADR)腹腔注射給藥(Adriamycin,ADR)試圖造成小鼠心衰。

橄欖油聯(lián)合酒精致肝硬化門脈高壓大鼠模型一、服務信息1、動物模型名稱:橄欖油聯(lián)合酒精致肝硬化門脈高壓大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:5周5、實驗動物體重:150g-180g6、實驗動物環(huán)境:SPF級二、服務項目服務編號服務內容服務周期價錢DH2016橄欖油聯(lián)合酒精致肝硬化門脈高壓大鼠模型20周詢價1、實驗方法:橄欖油聯(lián)合酒精誘導。按,背頸部皮下注射50%CCl4的橄欖油溶液,**注射量加倍(6mL/kg體重),2次/周,皮下注射共13周;造模前4周為10%酒精溶液喂養(yǎng)代替飲水,4周后改為30%酒精溶液灌胃(30%酒精溶液灌胃1mL/100g體重,3次/周)。繼續(xù)正常飼養(yǎng)1個月。實驗結束測量門靜脈血流量(PBF)和腸系膜上動脈血流量(SMABF)。處死,取肝臟進行組織病理學檢查。2、檢測標準:門靜脈及腸系膜上動脈血流量情況與正常對照組比較均增加,差異有統(tǒng)計學意義肝組織病理可見肝硬化病理改變。三、交付標準:1.提供動物模型構建過程中的原始實驗記錄及數(shù)據(jù)圖片。2.根據(jù)要求提供構建成功的模型動物或相關組織材料。四、服務項目說明:1、如有特殊要求,請另詢價。2、雙方簽訂合同后,收取70%首付后啟動實驗。人類疾病的動物模型是指各種醫(yī)學科學研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動物。湖南高脂高糖動物模型建模
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本發(fā)明涉及醫(yī)學工程技術領域,具體而言,涉及一種利用gm20541基因構建視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的方法和應用。背景技術:視網(wǎng)膜色素變性(retinitispigmentosa,rp)是一組視網(wǎng)膜光感受器異常導致的遺傳性致盲眼底病,在全世界的發(fā)病率約為1/3000~1/4000,而在中國人群的發(fā)病率可達1/3500,由于我國人口眾多,rp患者可達三十萬之眾,給家庭和社會帶來了沉重的負擔。目前針對rp的診斷和面臨許多困難,尚無有效的手段,這主要歸因于其在臨床表型和遺傳上具有高度的異質性,針對其病理機制系統(tǒng)研究不足。典型的rp患者早由于視桿細胞功能缺陷而出現(xiàn)夜盲和視野狹窄,逐步發(fā)展為管狀視野,直至失明;眼底檢查可見視網(wǎng)膜色素沉著。在病理學方面,典型的rp主要影響視桿細胞,造成視桿細胞死亡并繼發(fā)視錐細胞死亡,主要表現(xiàn)為光感受器受損、變性,視網(wǎng)膜外核層逐漸變薄直至消失,視網(wǎng)膜外網(wǎng)層及其他相關細胞層出現(xiàn)相應病理改變。此外,由于rp在臨床表型和遺傳模式上均具有高度的異質性,導致許多的rp致病機制尚不清楚,這為rp疾病的臨床診斷帶來極大困難,因此針對rp疾病的致病機制研究迫在眉睫。而目前,缺乏相應的rp疾病模型。西藏裸鼠動物模型服務