淀粉液化芽孢桿菌、出芽短梗霉和短梗霉,在生物發(fā)酵產(chǎn)酶過程中對溶氧電極水平的具體需求和差異說明。1、淀粉液化芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)BS5582 在 IOL - 全自動發(fā)酵罐規(guī)模生產(chǎn) β- 葡聚糖酶時,通過控制通氣量、罐壓和攪拌轉(zhuǎn)速進行溶氧優(yōu)化。在裝液量 6L,接種量 6.67%,發(fā)酵溫度 37℃的條件下,優(yōu)化后通氣量 9L/min,攪拌轉(zhuǎn)速 600r/min,罐壓 0.6MPa,β- 葡聚糖酶酶活在 44h 達到 511U/mL,比優(yōu)化前提高了 122.76%。2、從自然界中分離篩選出的短梗霉菌株 ipe-3 和 ipe-5,經(jīng) 2.7L 發(fā)酵罐發(fā)酵。研究發(fā)現(xiàn),在 70%溶氧條件下,ipe-3 聚蘋果酸產(chǎn)量為 10.027g/L,蘋果酸產(chǎn)量為 5.70g/L,ipe-5 聚蘋果酸產(chǎn)量為 03g/L,蘋果酸產(chǎn)量較高為 57.24g/L。與 70%溶氧條件下發(fā)酵產(chǎn)量相比,在 10%溶氧條件下,ipe-3 聚蘋果酸產(chǎn)量降低了 41.67%,蘋果酸產(chǎn)量降低了 62.63%;ipe-5 不產(chǎn)聚蘋果酸,蘋果酸產(chǎn)量降低了 83.05%。得出溶氧降低導(dǎo)致菌體濃度及葡萄糖利用速率降低,從而造成短梗霉發(fā)酵產(chǎn)酸的產(chǎn)量降低。溶氧電極的極化時間不足會導(dǎo)致初始測量數(shù)據(jù)漂移。北京微生物培養(yǎng)用溶解氧電極

如何結(jié)合先進的控制技術(shù)實現(xiàn)對溶氧電極水平的精確控制以提高產(chǎn)酶效率?脈沖電場技術(shù)劉振宇等人在2019年的研究中,采用響應(yīng)面法設(shè)計脈沖電場工作參數(shù)(脈沖強度5-15kV/cm、脈沖持續(xù)時間10-100μs和脈沖數(shù)50-99)并對黑曲霉孢子懸液進行處理和培養(yǎng)。結(jié)果表明脈沖強度很大程度影響菌絲干質(zhì)量和產(chǎn)糖化酶能力,當脈沖強度為12.975kV/cm、脈沖寬度為54μs和脈沖數(shù)為66時,黑曲霉的菌絲干質(zhì)量和糖化酶活性分別為28.05mg和18.01U/mL,比對照提高了68.27%和14.71%。雖然該研究主要針對黑曲霉生長和糖化酶活性,但脈沖電場技術(shù)可能為其他產(chǎn)酶過程中溶氧水平的控制提供新的思路。例如,可以通過脈沖電場刺激微生物的代謝活動,從而提高對溶氧的利用效率,進而提高產(chǎn)酶效率。武漢生物發(fā)酵用溶氧電極低溫環(huán)境下溶氧電極響應(yīng)變慢,可通過加熱裝置維持恒溫測量。

溶氧電極(溶氧水平對生物發(fā)酵產(chǎn)酶效率影響):不同的生物發(fā)酵過程對溶氧水平的要求可能不同。例如,黑曲霉液體發(fā)酵產(chǎn) α- 半乳糖苷酶的過程中,雖然沒有直接提到溶氧水平對產(chǎn)酶效率的影響,但可以推測,合適的培養(yǎng)條件,如碳源濃度、蛋白胨濃度、pH 值和培養(yǎng)溫度等,可能也與溶氧水平相互作用,共同影響產(chǎn)酶效率。對于某些微生物,可能在較低的溶氧水平下就能高效產(chǎn)酶,而對于另一些微生物,則可能需要較高的溶氧水平。這可能與微生物的代謝特性、酶的合成機制以及發(fā)酵過程中的其他因素有關(guān)。在實際生產(chǎn)中,需要根據(jù)具體的微生物和酶的類型,優(yōu)化溶氧水平,以提高產(chǎn)酶效率。
1、大腸桿菌對溶氧的需求,大腸桿菌是一種兼性厭氧菌,在有氧條件下可通過有氧呼吸高效代謝。在高密度發(fā)酵過程中,充足的氧氣供應(yīng)至關(guān)重要,通常需要將溶解氧(DO)水平維持在20%-30%。若DO低于此范圍,菌體可能轉(zhuǎn)向厭氧代謝,通過“Crabtree效應(yīng)”積累乙酸,進而抑制蛋白質(zhì)合成和菌體生長,影響發(fā)酵效率。2、DO-STAT控制策略,DO-STAT(溶氧關(guān)聯(lián)補料控制)是一種基于實時溶氧反饋的智能補料技術(shù),通過動態(tài)調(diào)節(jié)補料速率使耗氧與供氧達到平衡。該技術(shù)廣泛應(yīng)用于工業(yè)微生物發(fā)酵領(lǐng)域,尤其在大腸桿菌和酵母菌的高密度培養(yǎng)中表現(xiàn)優(yōu)異,是重組蛋白、疫苗及酶制劑生產(chǎn)的關(guān)鍵工藝之一。溶氧水平的精細控制直接決定了菌體生長速率和產(chǎn)物合成效率。3、溶氧監(jiān)測,目前發(fā)酵過程中的溶氧在線監(jiān)測主要依賴兩類傳感器,極譜型溶氧電極:傳統(tǒng)電化學傳感器,響應(yīng)快,需定期維護。光學溶氧傳感器:基于熒光淬滅原理,穩(wěn)定性高,維護需求低。4、溶氧分段控制根據(jù)發(fā)酵階段動態(tài)調(diào)整DO水平,可大幅度提升產(chǎn)物產(chǎn)量,生長期:維持DO20%-30%,配合高攪拌速率(500-800rpm),促進菌體快速增殖。誘導(dǎo)期:降低DO至10%-20%,減少乙酸積累,同時促進外源蛋白表達(如IPTG誘導(dǎo)系統(tǒng))。 溶氧電極使用前需進行兩點校準(空氣校準和零點校準)以確保精度。

溶氧電極在海洋監(jiān)測中也發(fā)揮著作用。海洋中的溶解氧分布影響著海洋生物的分布與生存,對海洋生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定至關(guān)重要。在海洋調(diào)查船、海洋浮標等設(shè)備上安裝溶氧電極,能夠?qū)崟r監(jiān)測不同海域、不同深度的海水溶解氧濃度。這些數(shù)據(jù)對于研究海洋生態(tài)系統(tǒng)的變化、海洋生物的遷徙規(guī)律以及海洋環(huán)境對氣候變化的響應(yīng)等方面具有重要意義,為海洋生態(tài)保護和可持續(xù)利用提供科學依據(jù) 。溶氧電極的響應(yīng)速度是其重要性能指標之一??焖夙憫?yīng)的溶氧電極能夠在溶液中溶解氧濃度發(fā)生變化時,迅速產(chǎn)生相應(yīng)的電信號變化,使操作人員能夠及時獲取的溶氧信息。例如在一些對反應(yīng)過程控制要求極高的工業(yè)生產(chǎn)中,如精細化工合成,快速響應(yīng)的溶氧電極可幫助工作人員及時調(diào)整反應(yīng)條件,避免因溶氧濃度變化未及時察覺而導(dǎo)致產(chǎn)品質(zhì)量問題。通常,通過優(yōu)化電極的結(jié)構(gòu)設(shè)計、選擇合適的透氣膜材料以及改進內(nèi)部電解液配方等方式,可提高溶氧電極的響應(yīng)速度 。溶氧電極廠商提供 24 小時技術(shù)支持,遠程指導(dǎo)用戶解決校準問題。江蘇熒光法溶解氧電極
溶解氧電極在好氧發(fā)酵中尤為重要,因為許多微生物的代謝活性高度依賴氧氣供應(yīng)。北京微生物培養(yǎng)用溶解氧電極
土壤中的溶解氧對植物根系的呼吸作用和土壤微生物的活動影響深遠,溶氧電極在土壤研究中也有用武之地??蒲腥藛T將特制的溶氧電極插入土壤不同深度,能夠測量土壤中溶解氧的垂直分布情況。這些數(shù)據(jù)有助于了解土壤的通氣性,判斷土壤是否處于健康狀態(tài)。微基智慧科技(江蘇)有限公司 例如,在濕地土壤研究中,通過監(jiān)測溶解氧,可分析濕地生態(tài)系統(tǒng)中物質(zhì)循環(huán)和能量流動的規(guī)律,為濕地保護和修復(fù)提供科學依據(jù)。微基智慧科技(江蘇)有限公司。北京微生物培養(yǎng)用溶解氧電極